基本方案
| 實驗方法原理 | 將淀粉切割成小片段和麥芽糖。不同來源的 α-淀粉酶的最適 pH 不同。從 Bacillus subtilis 中提取的細菌酶在 pH 5.5 時有其最高活性，并且必須采用適合的緩沖溶液。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶 |
| 試劑、試劑盒 | 磷酸鉀 麥芽糖溶液 淀粉溶液 二硝基水楊酸試劑 |
| 儀器、耗材 | 分光光度計 |
| 實驗步驟 |
實驗所需「試劑」具體見「其他」 0.05 ml 淀粉溶液 0.05 ml 酶樣品（稀釋于 0.1 mol/L 磷酸鉀，pH7.0）。 25 ℃ 培養 5 min 0.1 ml 二硝基水楊酸試劑 在 100 ℃ 混合 10 min 1 ml H2O 測 546nm 處吸收值值。 借助校準曲線測出酶的活性。濃度范圍在 4～30 ul 的麥芽糖溶液，用水補充到 0.1 ml，而后向每個樣品中添加 0.1 ml 二硝基水楊酸試劑。100℃ 孵育 10 min 后，加入 1 ml 水，并測 546 nm 處吸收值。 計算。 1 個單位被定義為：25℃、pH 7.0 時，每分鐘從可溶淀粉中釋放 1 mol 還原基團的酶量。
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| 注意事項 | |
| 其他 |
試劑： 0.1 mol/L 磷酸鉀，pH 7.0 10 mmol/L 麥芽糖溶液（一水合物，Mr＝360.3；36 mg 麥芽糖溶于 10 ml 水中） 淀粉溶液（0.5 g 可溶淀粉，17.5 mg NaCl，溶解于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.0，煮沸溶解） 二硝基水楊酸試劑（3，5-二硝基水楊酸，2-羥基-3，5 二硝基苯甲酸，Mr＝228.1；溶解 1 g 于 20 ml 2 mol/L NaOH 和 50 ml 水，溶解 30 g K-Na-酒石酸并用水補充至 100 ml）。
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