α酮戊二酸脫氫酶的測定實驗

α-酮戊二酸脫氫酶

磷酸鉀MgCl2α-酮戊二酸焦磷酸硫胺素K3［Fe（CN）6］牛血清蛋白

分光光度計

實驗所需「試劑」具體見「其他」

0.98 ml 實驗混合物

0.02 ml 酶樣品

30℃ 時，于 436 nm 處吸收值發生變化，ε₄₃₆＝755 l/（mol·cm）

試劑：

0.1 mol/L 磷酸鉀，pH 6.5

0.1 mol/LMgCl₂（MgCl₂·6H₂O，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）

0.5 mol/L α-酮戊二酸（α-酮戊二酸鹽，Mr＝190.1，二鈉鹽，0.95 g 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L 焦磷酸硫胺素（ThDP，脫羧輔酶，Mr＝460.8；46.1 mg 溶于 10 ml 水中），

0.1 mol/L K₃［Fe（CN）₆］（Mr＝329.2；330 mg 溶于 10 ml 水中）

1％ 牛血清蛋白（BSA，100 mg 溶于 10 ml 水中）