剛果紅染色法:
常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培養微生物,再加入剛果紅進行顏色反應,另一種是在倒平板時就加入剛果紅。
方法一 在長出茵落的培養基上,覆蓋質量濃度為1 mg/mI。的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物質的量濃度為l mol/I。的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此時,產生纖維素酶的茵落周圍將會出現透明圈。
方法二 配制質量濃度為10 mg/mI。的CR溶液,滅菌后,按照每200 mI。培養基加入1 mI。的比例加入CR溶液,混勻后倒平板。等培養基上長出茵落后,產生纖維素酶的菌落周圍將會出現明顯的透明圈。
兩種剛果紅染色法的比較
剛果紅在篩選纖維素分解菌上的應用已經有超過20年的歷史,課本中給出了兩種方法。方法一是傳統的方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發生混雜;其優點是這樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優點是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點是由于在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質,可以使能夠產生淀粉酶的微生物出現假陽性反應。但這種只產生淀粉酶的微生物產生的透明圈較為模糊,因為培養基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產生的透明圈相區分。方法二的另一缺點是:有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時間培養過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區分。
摘要:在pH4.1的Britton2Robinson緩沖介質中,剛果紅與蛋白質在室溫下能迅速結合生成紅色復合物,其最大吸收波長為488nm,比剛果紅本身紫移了32nm。用光度法研究了該結合反應的最佳條......
摘要在pH4.5~6.5的Britton-Robinson緩沖溶液中,鈷(II)與環丙沙星(CIP)、諾氟沙星(NOR)、氧氟沙星(OF)和左氧氟沙星(LEV)等氟喹諾酮類抗生素(FLQs)能形成螯合......
本方法采用剛果紅與蛋白質反應的基本條件,建立了以剛果紅測定蛋白質的分光光度分析法。適用于人血清樣品中總蛋白質的測定。......