細菌的培養和分離技術微生物分離鑒定流程第一節 細菌的形態學檢查工具:顯微鏡顯微鏡檢查的目的:1.鏡檢可以了解標本中有無細菌及大致的菌量2.根據細菌形態、排列和染色性有助于對標本中的病原菌進行初步診斷,對臨床早期診斷和治療疾病有一定的參考意義方法:包括不染色標本檢查法和染色標本檢查法常用的顯微鏡(1)普通光學顯微鏡(light microscope)光源:自然光或燈光,波長0.4μm最大分辨率:0.2μm(2)暗視野顯微鏡(darkfield microscope)(3)相差顯微鏡(phase contrast microscope)(4)熒光顯微鏡(fluorescence microscope)(5)電子顯微鏡(electron microscope)返回普通光學顯微鏡一、不染色標本直接鏡檢目的:主要用于檢查生活狀態下細菌的動力及運動狀況。常用的方法:懸滴法和壓滴法 懸滴法檢查細菌的動力不染色標本鏡下結果觀察:動力(+),動力(-)觀察時注意:用普通光學顯微鏡高倍鏡觀察,調小顯微鏡的光柵。有動力:可看到細菌自一處移至另一處,有明顯的方向性位移。無動力:細菌呈現布朗運動,只在原地顫動而無位置的改變。 意義:有些病原菌通過不染色標本的動力檢查可作出初步鑒定: 如疑似霍亂患者“米泔水樣”便中發現穿梭樣運動細菌,可輔助診斷。 螺旋體輔助診斷二、染色標本的顯微鏡檢查(一)常用染料(色基+助色基)1.堿性染料:堿性復紅、結晶紫、美藍等, 電離后帶正電荷,常用于細菌染色(原因何在?)。2.酸性染料:有伊紅、剛果紅等,電離后帶負電荷。3.復合染料(中性染料):復合染料有瑞氏染料(伊紅美藍)、姬姆薩染料(伊紅天青)等