酶聯免疫法是一種基于抗原抗體特異性反應的檢測方法，具有反應靈敏、特異性強等優點。在微孔板中包被抗乳鐵蛋白抗體（一抗），加入目標物乳鐵蛋白后，乳鐵蛋白與一抗結合，再加入乳鐵蛋白抗體（二抗）與之形成夾心結構，最后加入顯色劑，利用酶標儀測定特定波長的吸光度值，其吸光度值與乳鐵蛋白含量成正比，可繪制標準曲線達到定量檢測樣品中乳鐵蛋白濃度的目的。酶聯免疫法雖然靈敏度高，但通常需要進行多重的孵化、洗滌和清洗，操作較為繁瑣，且所用抗體及抗抗體制備不易，價格昂貴，不適合用于大批量的樣品分析。
