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  • 發布時間:2019-04-03 17:30 原文鏈接: 從普通無脊椎動物系統獲取配子實驗——海膽和沙幣

    實驗材料

    海膽和沙幣

    試劑、試劑盒

    KCl 溶液3-氨基-124-三唑

    儀器、耗材

    巴斯德吸管Nytex 濾器

    實驗步驟

    一、海膽和沙幣體腔內注射 0.5 mol/L 的 KCl

    1. 制備 0.5 mol/L 的 KCl 溶液。

    2. 用海水沖洗一下動物以去掉顆粒物質。

    3. 用一個 23~26 號的針頭向動物的口緣空腔內注射多達 500 μl 或 100 μl KCl。

    4. 用巴斯德吸管收集“干”精子,并儲存于置于冰上的小塑料管中。‘

    5. 將雌性動物在一杯海水中翻過來收集卵子。

    6. 用 Nytex 濾器洗卵子,以去掉顆粒,并使卵子吸附到濾膜上。

    7. 通過將水吸走或小心倒掉,再加入潔凈的海水將卵子洗幾遍。

    二、海膽的電刺激

    1. 將海膽反口面向上放在紙巾上。

    2. 將兩個電極一邊一個放在接近生殖管的貝殼部位,配子就會從生殖孔中釋放出來。

    3. 如果需要,在生殖管周圍的幾個部位通以電流。

    4. 開始收集卵子和精子,并受精。

    三、海膽和沙幣卵的受精

    1. 制備稀釋的精子懸液。

    2. 向洗過的卵中加入精子。

    四、受精膜的去除

    1. 獲取卵子。

    2. 將卵子重懸于含有 1mmol/L 3-氨基-1,2,4-三唑的海水中。

    3. 受精。

    4. 當受精膜出現后,將卵子倒入直徑比卵子小幾微米的 Nytex 網中。




    展開


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