儀器的定量分析校正

在光譜儀器定量分析中，一般在分析樣品前都需要采用標準物質對儀器進行校正，即建立儀器響應信號與被分析物質濃度的關系。根據儀器校正操作方式的不同，常用的校正方法有三種：工作曲線法、標準加入法和內標法。具體在進行定量分析時，選擇哪一種校正方法，應考慮儀器方法特點、待測試樣基質中存在的干擾程度等因素，才能得到準確可靠的數據。

(1)工作曲線法 工作曲線法又稱為外標法。它是首先用一系列已知濃度的標準試樣校正儀器，即依次測量各標準試樣的儀器響應值，以各標準試樣得到的響應與其中分析物濃度建立一定的關系曲線。然后在相同的條件下，測定待測試樣的響應值，根據標準試樣響應值與濃度關系計算待測試樣的濃度。通常情況下，工作曲線在線性范圍內，分析物在儀器上的響應與其濃度有線性關系。對于非線性工作曲線需要大量的校正數據，以準確地確定儀器的響應和濃度之間的關系。工作曲線法通常采用最小二乘法進行處理，直接計算試樣的濃度。該方法適用范圍廣，是儀器分析中最基本的定量方法。為了提高測定的準確度，繪制工作曲線的條件應與測定試樣的條件盡量保持一致，否則不宜用此法。

為了減小試樣中基體效應帶來的影響，不僅標準試樣的濃度應在工作曲線濃度范圍內，而且在基體組成上應盡量與試樣相似。必要時，所有標準試樣應添加與待測樣品一致的基體，即基體匹配工作曲線法。

(2)標準加入法標準加入法又稱增量法。該方法是將已知量的標準試樣加入到一定量的待測試樣中即制備加標試樣，通過測定不同加標量的加標試樣的儀器響應值(或其函數)后，進行定量分析待測試樣含量的方法。

標準加入法如只進行一次加標，根據未加標標準試樣與加標試樣的儀器響應值，可用一定的關系式進行計算獲得待測試樣含量。也可通過多個不同添加量加標(其它完全一樣)，以加標試樣的儀器響應值對標準試樣添加量繪制工作曲線。根據曲線外推在橫坐標上的截距絕對值為待測試樣含量。

在大多數方式的標準加入法中，每次添加標準試液后，試樣的基體幾乎都是相同的，僅僅是分析物的濃度不同，或者因添加過量的分析試劑，使試劑的濃度不同。標準加入法可很好地減小或消除基體效應的影響，但操作較為煩瑣，必須為每個樣品進行多個加標測試。通常用于基體效應明顯而由于基體成分復雜，難以采用基體匹配進行干擾校正的樣品，如當測定土壤、植物等試樣時，配制與試樣相似的基體物是極其困難的。值得注意的是，標準加入法要求儀器的響應必須是分析物濃度的一個線性函數。

(3)內標法 內標法是在試樣和各含量不同的一系列標準試樣中，分別加入固定量的待測物質以外的純物質，即內標物。同時測得加入內標的標準試樣中分析物和內標物對應的響應，以分析物和內標物的響應比對分析物濃度作圖，即可得到相應的內標法校正曲線。最后用測得的試樣與內標物的響應比在校正曲線上獲得對應于試樣的濃度。內標法實際上是外標法的一種改進。

對于儀器精密度相對較差或影響響應參數較多的儀器，采用內標法可減少儀器波動對結果的影響，從而獲得更精確的分析結果。使用內標法時，應正確選擇內標物及濃度。一般內標物在物理和化學性質上要類似于分析物，內標物信號既不能干擾分析物，又不能被試樣中其它組分干擾，并且易于測量。內標物的濃度與分析物的濃度應控制在同一數量級上。