一抗的用量和樣品中的目標分子含量相關,如果含量較高,就不需要用太多一抗,以免浪費和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度(義翹神州會提供抗體用量、天然細胞株檢測結果),如果樣品與廠家的不是一種細胞,可以嘗試上下摸索一兩個濃度梯度;二抗的用量,和你所在實驗室常規的用量就可以,如果出現效果不理想的狀態,二抗的作用可以通過陽性對照和陰性對照、以及其他人的使用效果看出來有沒有問題。