關于生物反應器的應用—翻譯與修飾的介紹

　　生物反應器— 轉基因動物分泌的蛋白，特別是糖鏈成分的結構與人體蛋白有差異。因此研究分泌蛋白的修飾就顯得很重要。在乳腺生物反應器中，蛋白質翻譯前修飾的主要方式是在多個位點對乳腺中的蛋白前體進行信號肽剪切和對糖鏈進行修飾。例如，從山羊乳液中得到的長效組織型纖溶酶原激活劑與人體內和相比較，含有少量的異種（外源）低聚糖，同時，唾液酸、N-乙酰葡萄糖胺和半乳糖含量明顯減少，關且出現缺少蛋白質C127的N-乙酰半乳糖胺。此外，從豬乳液中得到的C蛋白中是沒有的；從羊乳液中得到的重組α1-抗胰蛋白酶多聚肽也反映了唾液酸酸化程度的差異；在山羊乳腺中觀察到了重組抗凝血酶Ⅲ上低聚甘露糖與特異天冬酰胺的位點特異性聚合等等。研究小鼠乳液中的重組γ-干擾素可對翻譯前修飾有更好的理解，γ-干擾素有大量的位點特異性變化，在N端連接位點進行復雜的唾液酸酸化和連接核心巖藻多聚糖，其次是低聚甘露糖。與從小鼠細胞中取得的蛋白質相比，分泌的重組蛋白沒有GalNAc、NeuGC和Gal∞l 、3Gal-βl、 4GlcNAc殘基。這些蛋白特異性的糖基化類型可與細胞上的受體結合并清除病人體內的重組蛋白，因此可能會影響療效，最終的結果尚有待驗證。

　　生物反應器— 同源組織表達蛋白質的優點是可對表達產物進行調控并校正珠蛋白鏈的翻譯過程，避免無效的翻譯前修飾，使產物蛋白盡可能與人體天然蛋白相似，降低人體內的排斥反應，提高藥物蛋白療效。蛋白分離技術飛速發展，大大提高了蛋白質分離的可行性和分離效率。第二種技術路線中以乳腺生物反應器較為多見，因為乳汁易得到，且乳汁中的特異蛋白含量較大，對蛋白水解酶的降解作用也比較穩定。乳汁是一種混合物，含3%～6%的總蛋白，3%～5%的脂類，對蛋白提純技術要求比較高。另一方面，藥用蛋白是在動物乳腺中產生。因此只有含轉基因型人雌性動物在泌乳期才能生產藥用蛋白，可用的動物數目有限，且生產期較短。膀胱生物反應器的優點在于含有轉基因型的兩性動物都可用，產后收集時間長，提取產物蛋白濃度雙乳液中的含量低得多，盡管收集的尿液多且時間長，生產單位數量的藥用蛋白在乳腺和膀胱生物反應器中的成本是差不多的。