1﹒檢驗方法學
(1)原理:
冷凝集素試驗(col d agglutinin test):冷凝集素為可逆性抗體,在低溫時與自身紅細胞、“O ”型紅細胞發生凝集,當溫度增高時,凝集又消失。
(2)器材和試劑:
冰箱、水浴箱、試管、試管架、吸管(1ml和0.2ml)、玻璃棒;0型或與受檢者ABO同型抗凝血、受檢者血清、生理鹽水。
(3)操作
1)分離標本血血清:
取被檢者靜脈血3ml,立即移入37℃試管內待血凝固后、用玻璃棒去除血塊,置37℃水浴箱待血清析出,即離心分離血清,移入另一試管。
2)稀釋系列血清:
取試管12支列于試管架上,各管加0.2ml生理鹽水。第1管內加被檢者血清0.2ml,用另1支吸管3次吹吸第1管混合血清,再取0.2ml移入第2支試管內,以此類推,至第11管后,吸棄0.2ml血清稀釋液(系列血清稀釋度為液1
∶2~1 ∶2.048)。第12管為對照管,不加血清。
3)制備2%紅細胞懸液:
取正常“0 ”型抗凝血1~2ml,用生理鹽水洗滌紅細胞3次后制備2%紅細胞懸液。
4)置冰箱孵育:
在以上12支試管中各加紅細胞懸液0.2ml,置4℃冰箱,≮2h,立即肉眼判讀結果:
(++++):紅細胞凝集成一大塊,幾乎無游離紅細胞。
(+++):雖凝集成一大塊,或2~3個大塊,但約有1/4游離紅細胞。
(++):有幾個大凝集塊,但約有1/2游離紅細胞。
(+):只有小凝集顆粒,大部分為游離紅細胞。
(±):與第12管對照有凝集,但未及“+”者。
5)置水浴箱:
將操作4)試管再置37℃水浴箱30min后,判讀結果:若凝集塊全部散開,示存在冷凝集素。
2﹒質量保證
①被檢者血液在未分離血清前,不可置冰箱,否則,應置37℃水浴1h后,再分離血清。②若無O型紅細胞,可用被檢者自身紅細胞或與被檢者同型紅細胞替代。③若冷凝集素滴度過高,可將血清作4倍系列稀釋。
3﹒參考值
滴度<1 ∶16。
4﹒臨床意義
各地區正常人血清冷凝集素參考值不一,故應確立本地區的參考值。冷凝集素滴度顯著增高見于某些自身免疫性溶血性貧血(尤其冷凝集素病);也見于病毒性肺炎、傳染性單核細胞增多癥、熱帶嗜酸性粒細胞增多癥、瘧疾、多發性骨髓瘤、肝硬化等。
英文同義詞:
cold agglutination test
參考文獻:
1 叢玉隆,王金良,李曉軍,涂植光,熊立凡.實用檢驗醫學 下冊.第1版.北京.人民衛生出版社,2009年05月