考馬斯亮藍染色測定蛋白質是一種經典的方法,但按傳統方法配成的顯色劑卻存在著溶解不完全、比色池上極易沉積等問題,實際操作時對測定的準確性干擾較大。為此2010年張弘等人對考馬斯亮藍顯色劑中進行了改良,加入了大分子的醇類和酚類物質,新研制的顯色劑溶液溶解度好,比色池上沉積很少,且穩定,存放一年不影響測定。
此外還研發出了牛奶蛋白質快速檢測儀,該儀器體積小、操作簡便、檢測速度快、靈敏度高,且能有效消除添加的三聚氰胺、尿素、硫酸銨等無機氮,及水解植物和動物蛋白等小分子多肽氮對牛奶中蛋白質檢測的干擾,從而能從根本上杜絕牛奶中摻假蛋白檢測題,可用于現場牛奶真蛋白質快速檢測。結果表明,牛奶中蛋白質分子量絕大部分集中分布在1×104~7×104u以上和1×104u以下分子量的蛋白質所占的比例很小。綜合應用牛奶中蛋白質的分子量分布特征和考馬斯亮藍染色法的特性研發出。
該法通過對考馬斯亮藍進行改良,基于馬斯亮藍染色法的特性和牛奶中蛋白質分子量的分布特征研制出牛奶蛋白質快速檢測儀。分子量約1 ku以上含氮物中的肽鏈和考馬斯亮藍結合,在波長595nm處達到最大吸收值。牛奶中的蛋白質主要是酪蛋白和清蛋白兩大類,它們的分子量大多在1×104~3×104u;
蛋白質分離檢測儀檢測的結果表明:牛奶中的蛋白質分子量集中分布在1×104~7×104u,和考馬斯亮藍的顯色作用非常明顯,因此靈敏度很高。牛奶中的其他物質,如脂肪、多糖、維生素等均不與考馬斯亮藍作用,摻假物質,如三聚氰胺、尿素和硫酸銨等基本也不顯色,因此能有效識別;
而水解植物和動物蛋白中,大部分是小分子肽,只有很少一部分的大分子蛋白質才能顯色,但如果要達到和牛奶相同的顯色值,含氮量要達到牛奶的20倍左右才能做到,因此,用牛奶蛋白質快速檢測儀測定蛋白質,可有效地防止牛奶中摻假蛋白質的干擾,從而能從根本上杜絕牛奶中摻假蛋白的檢測問題,可用于現場牛奶真蛋白質的快速檢測。