凝膠色譜儀分析技術

凝膠色譜儀分析中不具有分配、吸附和離子交換作用，是基于樣品分子尺寸和形狀不同實現分離的。

一、工作原理：

小分子可以擴散到凝膠空隙中通過，出峰最慢。

中等分子只能通過部分凝膠空隙，中速通過。

大分子被排斥在外，出峰最快。

二、固定相：

1、半剛性凝膠：

為高交聯度的聚苯乙烯，孔徑范圍較寬。

常以有機溶劑作流動相。

2、剛性凝膠：

為多孔硅膠。

可用水溶性溶劑和有機溶劑作流動相。

可在較高壓強和較高流速下操作，但易拖尾。

三、流動相：

常用流動相有甲苯、苯、CH₂Cl₂、CHCl₃、CCl₄、四氫呋喃和水溶液等。

1、能溶解樣品。

2、不應造成填料太大的溶脹和收縮。

3、控制pH和離子強度，可消除非排除機理的影響。

4、盡量降低溶劑粘度（加電介質）。

5、選擇與樣品折射率差別大的溶劑。

四、特點：

1、樣品全部在溶劑的保留時間前洗脫。

2、色譜柱內的峰擴展較小。

3、.峰較窄，有利于檢測。

4、.采用示差檢測器。

五、不足：

1、峰容量小。

2、不能分離大小相似和分子量接近的樣品。

六、應用：

適用于分子量不同的大分子樣品（Mr＞2000）的分離。