動物組織中喳諾酮類殘留量的測定方法實驗

動物組織

乙酸-乙腈 正己烷 磷酸鹽-三乙胺緩沖液

相色譜條件色譜柱 離心管 注射器

1.  前處理

稱取約2 g解凍試樣，切成薄片并放入50 mL離心管中，加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液，均質1 min后放入超聲波池中超聲3 min， 4500 r/min離 心5 min，將上清液小心移入100 mL塑料離心管中，離心殘渣用20 mL 1%乙酸-乙腈溶液再提取一次，合并上清液。

將合并后的上清液用乙腈飽和正己烷25 mL脫脂凈化，棄去上層溶液，下層液移至100 mL燒瓶中，于40 ℃水浴中旋轉蒸發近干，用氮氣吹干。在殘渣中加入1 mLHPLC流動相，快速混勻和超聲3  min溶解殘渣。將溶解液轉移至1 mL —次 性注射器中，通過注射器濾膜（0.45 um）過濾至HPLC進樣小瓶中，進行HPLC 測定分析。

2.  儀器參數液

相色譜條件色譜柱：4.0 mm × 250 mm× 5 um， Hyprsil ODS；

柱溫：30 ℃；

洗脫模式1: 0.01 mol/L磷酸鹽-三乙胺緩沖液（pH3.0）（0.68 mL磷酸用水稀釋至1 L，再用三乙胺調節酸度至pH3.0）。磷酸鹽-三乙胺緩沖液-乙腈（80 + 20）混合，流速：1 mL/min。

洗脫模式2: 梯度洗脫，流速 0.8 mL/min。