(a) 將臍血樣品用PBSA按1:1比例稀釋。
(b) 將15mLFicoll-Hypague吸入50mL離心管。
(c) 將30mLPBSA稀釋的臍血樣品緩慢地加到Ficoll-Hypague上。
(d) 室溫450g離心20?30min。
(e) 離心后,在Ficoll-Hypague液面上明顯可見一層細胞,是密度低于FicoIlHypague液的單個核細胞層。
(f) 用巴氏吸管,將單個核細胞層吸出,轉移到另一離心管中。
(g) 用PBSA洗細胞,室溫200g離心10min。
(h) 倒掉上清,用PBSA重懸細胞,洗細胞,重復上述步驟(g)。
(i) 最后,用合適的培養基重懸細胞(冰凍液或培養基) 展開 |