1. 將已接種細菌的血平板以及產氣管，指示劑，催化劑放入塑料袋內，排出袋中氣體，卷疊好袋口，并用大鐵夾將塑料袋夾緊密，以防漏氣。
2. 折斷產氣管，管內發生反應，產生CO2和H2。CO2供細菌生長需要，能促使許多厭氧菌生長，鈀催化劑可催化H2和袋內的O2 生成H2O，從而耗盡袋內的O2，待其化學作用完成后，袋內即處于無氧狀態。（由此造成厭氧環境約需半小時）
3. 于產氣管弄破半小時后，將裝有已還原成無色的美藍指示劑安瓿弄破，若溶液變藍色，表示美藍被氧化，袋內仍有氧氣存在，如指示劑不變藍色，即表示袋內已處于無氧狀態。
4. 將厭氧袋置37 ℃溫箱孵育，48小時后觀察結果。 展開 | 