原代細胞的脂類染色方法蘇丹紅Ⅲ染色法

細胞樣品

蘇丹紅Ⅲ 70%乙醇 甲醛 CaCl2 明膠 蒸餾水 甘油 苯酚

蓋玻片 水浴鍋 載玻片 顯微鏡

一、配制試劑：

1. 蘇丹紅Ⅲ染色液：將1g蘇丹紅Ⅲ溶于加溫的70%乙醇溶液中過濾備用；

2. 甲醛鈣固定液：將10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml；

3. 甘油明膠：將12g明膠加入120ml蒸餾水中水浴加熱使其完全溶解，再加入60ml甘油和1g苯酚，充分混勻后即得。于4℃儲存備用；

二、染色步驟：

1. 用Hanks液漂洗蓋玻片3次；

2. 用甲醛鈣固定液固定20min；

3. 用蒸餾水漂洗蓋玻片3次；

4. 用70%乙醇將蓋玻片沖洗3次；

5. 用蘇丹紅Ⅲ染色液覆蓋蓋片樣品，染色10—30min；

6. 用70%乙醇漂洗蓋片3次；

7. 用甘油明膠封片后觀察；

三、結果：

原代細胞含脂類的區域呈橘紅色；

在染色時，要保證時間防止染色不徹底，顏色不明顯。