基因敲入（gene knock in）是利用基因同源重組，將外源有功能基因（基因組原先不存在、或已失活的基因），轉入細胞與基因組中的同源序列進行同源重組，插入到基因組中，在細胞內獲得表達的技術。
基因敲入有兩種，一種是原位敲入,即在原基因敲除的位點插入新基因,它是基因敲除的逆過程；另一種是定點敲入,即無論敲除基因的位點在哪里,敲入的基因是在特定啟動子下，以轉移載體的形式轉座進去,所以插入的位點是一定的。
