一、孔雀綠磷鉬雜多酸分光光度法
1.方法原理
在酸性條件下,利用堿性染料孔雀綠與磷雜多酸生成綠色離子合物,并以聚乙烯醇穩定顯色液,直接在水相用分光光度法測定正磷酸鹽。其摩爾吸光系數為1×105L(mol·cm)。
2.干擾及消除
對于含磷2 μg/50 ml體系,下述離子的含量(mg):Cl-4.2,Mn2+23.6,Al3+30,Na+2.8,Br-2.4,NO3-2.0,K+,Ca2+,Cu2+,Ni2+和Zn2+1.2,Fe3+1.0,Mg2+,NH4+0.6不影響測定。而100倍以上的硅,75倍以上的As3+和1/4磷含量的As5+均產生正干擾,添加2～3 ml 0.5 mol/L酒石酸或1～2 ml 0.25 mol/L檸檬酸均可有效消除磷含量350倍的硅、100倍的砷(Ⅲ)以及0.5倍砷(V)的擾。過量的掩蔽劑會產生負干擾,須加以注意。
3.方法的適用范圍
本方法主要適用于湖泊、水庫、江河等地表水及地下水中痕量磷(總磷、溶解性正磷酸鹽和溶解性總磷)的測定,最低檢出濃度為1 μg/L。適用的濃度范圍為0～0.3 mg/L。
4.儀器
①分光光度計;②民用壓力鍋,1～1.5 kg/cm2。
5.試劑
①鉬酸銨溶液:溶解176.5 g銀酸銨于水中,并稀釋至1000 ml;②孔雀綠溶液:溶解1.12 g孔雀綠(氯化物)于水中,并稀釋至100 ml;③磷酸鹽貯備液;④磷酸鹽標準使用溶液:吸取5.00 ml磷酸鹽貯備液于250 ml容量瓶中,用水稀釋至標線。此溶液每毫升含1.00μg 磷,臨用時現配;⑤聚乙烯醇(PVA)溶液:取工業級PVA(平均聚合度500左右)1 g溶100 ml熱水中,濾紙過濾后使用;⑥顯色劑:在40 ml鉬酸銨溶液中依次加入30 ml濃硫酸和36 ml孔雀綠溶液,混勻。靜置30 min后,經0.45 μm微孔濾膜過濾。臨用時現配,并存放在4℃左右的冰箱內;⑦5%過硫酸鉀溶液:溶解5 g過硫酸鉀于水中,并稀釋至100 ml;⑧硫酸:分析純。
6.步驟
(1)樣品預處理
取混勻水樣25.0 ml于50 ml具塞比色管中,加4 ml 5%過硫酸鉀溶液,加塞并用紗布包扎好,置于壓力鍋中,于120 ℃下消解30 min,取出放冷,供水中總磷測定。
(2)標準曲線的繪制
取數支50 ml具塞比色管,分別加入磷酸鹽標準使用溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 ml,加水至50 ml。用移液管加入5.0 ml顯色劑,再加入1.0 ml 1%PVA溶液,混勻。放置10 min,用2 cm比色皿,在620 nm波長處以零濃度溶液為參比,測量吸光度。
(3)樣品測定
取適量經預處理后的水樣(含磷量不超過15 μg),用水稀釋至標線,以下按繪制標準曲線步驟進行顯色和測量,減去空白試驗的吸光度,并從校準曲線上查出含磷量。
(4)空白試驗
以水代替水樣,按相同步驟,進行全程序空白測定。
7.計算
式中:m——由標準曲線查得的磷量(g);V——水樣體積(ml)。
8.精密度和準確度
七個實驗測定總磷和正磷酸鹽含量分別為0.204 mg/L和0.500 mg/L的統一樣品,室內相對標準偏差分別為2.98%和1.77%;室間相對標準偏差分別為7.34%和7.84%;加標回收率分別為98.0%±4.1%和101.0%±7.7%
9.注意事項
①顯色劑臨用時現配,并在4 ℃左右冰箱存放。
②過量掩蔽劑會產生負干擾。
③在測量過程中PVA的聚合度有影響,應使用同一種PVA試劑。