標記物
標記物是指通過直接或間接的化學反應將放射性核素連接到被標記分子上所形成的化合物。制備高比度、高純度和具完整免疫活性的標記物是建立高質量放射免疫分析法的重要條件。在放射免疫技術中,常用的放射性核素有放射γ射線和β射線兩大類。前者主要為 125I、131I、57Cr 和 60Co;后者為3H、14C 和32P。其中使用最廣泛的是125I,其優點為:
①125I 的化學性質較活潑,制備標記物的方法簡便;
②125I 衰變時產生的γ射線,對標記多肽、蛋白質抗原分子的免疫活性影響小;
③γ射線測量簡便;
④125I 的半衰期(60天)、核素豐度(>95%)及計數更適用。而3H 和14C 在衰變時產生的β射線雖易防護,標記物的有效期長;
但核素衰變半衰期長,制備標記物和β射線測定需用的設備條件復雜,不易在一般實驗室進行。
被標記的化合物一般要求其純度應大于90%,且具完整的免疫活性,以避免影響標記物應用時的特異性和測定靈敏度;此外,對于需在化合物分子中連接前述反應基團時,應注意引入的分子結構不能掩蓋抗原-抗體決定簇。