如懷疑有HDN可能時，最好在產前開始檢查，以期及早診斷及采取適當的預防與治療措施。
（1）血清學檢查：首先要對孕婦做AB0血型系統及Rh系統的D抗原檢查及不規則抗體篩選，所有篩選出陽性抗體都要區別是IgG或IgM，并應進一步做抗體鑒定分析，以確定是否會引起HDN.因為抗體的存在并不一定都會發生HDN醫|學教育網搜集整理。
（2）羊水分析：有必要時，并且在有條件的情況下可以做子宮穿刺抽取羊水進行分析，檢查胎兒血型物質，確定胎兒血型。在450nm處測定膽紅素含量的吸光度值，吸光度值越高表示官內溶血越嚴重。