根際pH的顯色測定實驗

小麥幼苗

NH4+的培養液溴甲酚紫

培養皿扭力天平電爐pH計 量筒燒杯移液管玻棒鑷子洗耳球吸水濾紙塑料薄膜瓊脂

一、材料和設備

小麥幼苗，直徑10 cm 的培養皿，扭力天平，電爐，pH計，50 ml 量筒，100  ml 燒杯，0.5  ml 移液管，玻棒，鑷子，洗耳球，吸水濾紙，10×10cm 塑料薄膜，瓊脂

50pp M 含NH4+的培養液：（1000  ml H2O+183 M g（NH4）2SO4+136 M gCaSO4）

0．6%溴甲酚紫：0.6克溴甲酚紫用少量95%酒精溶解后，用蒸餾水定溶至100  ml

0.01N NaOH，0.01N HCl

二、實驗步驟

1．顯色基質的準備：取50  ml 含50pp M  NH4+的培養液，加入0.5克瓊脂和0.5  ml  0.6%的溴甲酚紫指示液，在電爐上攪拌加熱至沸騰。然后冷至40℃左右時，用稀NaOH或稀HCl調pH至6.0（暗紅色）。

2．顯色：將瓊脂－指示劑混合液倒入培養皿中，使之成為均一的薄層，冷卻凝固后備用。取預先培養7－10天的小麥幼苗（根長10cm 左右）1株，用蒸餾水沖洗根系，于塑料薄膜（10×10cm ）上展平，并用吸水紙吸干薄膜和根表的水分，反轉貼于已凝固的瓊脂－指示劑混合液上，輕壓驅除氣泡并使根系嵌入凝膠中。室溫條件下1小時左右，pH指示劑即顯顏色變化。

3．觀察現象并解釋結果：pH指示劑不同顏色指示出不同根際部位的pH值。觀察根系周圍瓊脂－指示劑混合液的顏色變化，確定根系pH是上升還是下降，說明根系pH值變化的原因。本實際可用標準瓊脂－指示劑作對照，確定各根區的pH值，還可用微電極進行精確測定。

1．溴甲酚紫顯色范圍為pH5.2－6.8（黃－紫），適用于微酸性條件下使用；

甲酚紅變色范圍為pH7.2－8.8（黃－紅），適用于堿性條件下使用。

2．塑料薄膜和根表的水分必須吸干，否則影響顯色結果。