1 、梅毒螺旋體感染的檢測方法
1.1 概述
由于梅毒螺旋體侵入機體可產生非特異的反應素和抗密螺旋體抗體等兩種抗體，因而免疫測定方法可根據所使用的抗原分為非密螺旋體抗原血清學試驗和密螺旋體抗原血清學試驗兩大類，前者以心磷脂為抗原檢測血清中抗心磷脂抗體，也就是所謂的反應素；后者則是以密螺旋體或其成分為抗原檢測血清中特異的抗密螺旋體抗體。
1.2 非密螺旋體抗原血清學試驗
非密螺旋體抗原血清學試驗基本原理就是采用從牛心中提取的心磷脂作為抗原，梅毒螺旋體在破壞機體組織的過程中，體內釋放一種心磷脂抗原，這種抗原可刺激機體產生相應的抗體即反應素，其與牛心中提取的心磷脂在體外可產生免疫結合反應。此類試驗主要包括VDRL（venereal disease research laboratory test）、RPR（rapid plasma regain circle card test）和甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）等。
非密螺旋體抗原血清學試驗操作簡便快速，但是由于其所用的抗原是類脂質抗原，而不是密螺旋體抗原，因此特異性較差，可在多種疾病中出現假陽性的結果，例如麻風、結核、紅斑狼瘡、類風濕關節炎、猩紅熱等，據報道上述實驗在沒有梅毒感染史的正常人群中陽性率達0.1%。此外，由于感染梅毒螺旋體后，機體血循環中心磷脂抗體的出現要晚于特異性的抗梅毒螺旋體抗體，并且三期梅毒這類抗體還有可能轉陰。
基于以上原因，通常不推薦采用非密螺旋體抗原血清學試驗作為梅毒的篩查試驗，可用于梅毒疾病活動性的判定、療效檢測等。
1.3 密螺旋體抗原血清學試驗
密螺旋體抗原血清學試驗又稱為梅毒特異性抗體檢測試驗。目前較為常用的有：熒光密螺旋體抗體吸收試驗（fluoresent treponemal antibody-absorption test, FTA-ABS）、梅毒螺旋體血球凝集試驗（treponema pallidum hemagglutination assay, TPHA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（treponema pallidum particle agglutination assay, TPPA）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、化學發光免疫分析（CLIA）和蛋白印跡技術（Western blotting,WB）。這些血清學試驗大部分采用重組抗原，并檢測總的抗密螺旋體抗體（IgG和IgM）。通常采用密螺旋體抗原血清學試驗（如TPPA、TPHA、ELISA、CLIA等）作為篩查試驗。
1.4 特異性梅毒螺旋體IgM血清學試驗
包括19S-IgM-FTA-ABS、梅毒螺旋體IgM免疫印跡和特異性抗梅毒螺旋體IgM ELISA等。
2、梅毒螺旋體感染的實驗室檢測程序
2.1 篩查試驗
a） 采用密螺旋體抗原血清學試驗，如ELISA和TPPA/TPHA（TPPA優于TPHA）作為篩查試驗；
b） 如懷疑一期梅毒，可進行特異性梅毒螺旋體IgM血清學試驗，如有必要，可在1-2周后重復檢測；
c） 在特殊情況下，可以采用快速密螺旋體血清學試驗，但是陽性結果必須經過血清學確認試驗驗證；
d） 不推薦RPR/VDRL/TRUST作為血清學篩查試驗。但是，RPR/VDRL可用于對有臨床癥狀的高風險患者進行早期梅毒的快速檢測，同時采用密螺旋體抗原血清學試驗（ELISA或TPPA）作為補充試驗。此時進行RPR/VDRL/TRUST檢測時，需對血清樣本進行原倍以及稀釋檢測，以避免前帶現象導致的假陰性結果。
2.2 篩查試驗陽性結果的確認
a） 推薦采用與篩查試驗中不同的密螺旋體抗原血清學試驗進行確認：如果采用ELISA進行篩查，則采用TPPA或TPHA進行陽性結果的確認；如果采用TPPA或TPHA進行篩查，則采用ELISA進行陽性結果的確認。如果確認結果為陽性，可采用TPPA或TPHA進行定量。
b） 當TPPA/TPHA與ELISA結果不符時，IgG蛋白印跡可以為作補充性的確認試驗。
c） 通常不推薦采用FTA-ABS作為確認試驗。但是，如果在非常專業的實驗室，確認試驗的檢測量非常大，并且可以保證試劑的檢測質量以及良好的重復性，也可以采用FTA-ABS。
d） 如有必要，可以陽性結果的患者重新采樣，并且再次檢測以驗證檢測結果。
2.3 檢測梅毒的血清學活動性
當確認試驗的結果為陽性時，應采用RPR/VDRL進行血清學的定量檢測來判定疾病的活動性。如已經過有效的治療，則RPR/VDRL檢測的抗體滴度通常<32；如抗體滴度<32或為陰性結果，也不能排除活動性感染，盡管這種情況非常少見。
如果確認試驗結果為陽性且有臨床癥狀的PRP/VDRL陰性的患者，應進行特異性的密螺旋體IgM檢測，如密螺旋體IgM陽性，則提示活動性感染；密螺旋體IgM陰性不能排除活動性感染，特別是患者處于梅毒感染的晚期時。
3 、梅毒螺旋體抗體檢測的結果報告和解釋
3.1 梅毒螺旋體抗體檢測陰性
梅毒螺旋體抗體檢測陰性表示未感染梅毒螺旋體，但也可能存在以下情況：
――梅毒螺旋體感染的窗口期（大約２-４周）；
――RPR/VDRL檢測陰性可以在二期梅毒、潛伏期出現，在神經梅毒早期如果使用未稀釋的樣本檢測也可能出現假陰性的結果；
――晚期梅毒由于心磷脂抗體逐漸減少，也可能出現假陰性的結果；
在二期梅毒中，偶有報道出現一過性的血清學陰性結果。
3.2 梅毒螺旋體抗體檢測陽性
梅毒螺旋體抗體檢測陽性表示梅毒螺旋體抗體陽性，但也可能存在以下情況：
――在自身免疫病、HIV感染、孕期婦女、靜脈藥癮者中均有可能出現梅毒螺旋體抗體假陽性結果；
――FTA-ABS檢測在自身免疫病患者中更容易出現假陽性結果；
――生物學假陽性反應，指存在抗心磷脂抗體，但抗心磷脂抗體并非由梅毒螺旋體引起。
這種情況通常出現在使用RPR/VDRL檢測中。生物學假陽性反應分為急性反應（持續時間<６個月）和慢性反應（持續時間>６個月）。急性生物學假陽性反應可見于孕期婦女、近期進行過免疫接種、近期發生過心肌梗塞以及發熱性感染性疾病。慢性生物學假陽性反應可見于靜脈藥癮者、自身免疫病、麻風、慢性肝病（慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎等）以及老年人。
——如果缺乏梅毒的感染史或密螺旋體IgM陽性的結果，在單個密螺旋體抗體血清學試驗（其它試驗均為陰性）中出現的持續或者暫時的陽性結果可認為是假陽性結果。