1.準備立體定位穿刺
（1）根據胸部平片、體層攝片或CT片，初步選定距病變最近的穿刺徑路，通常可取：前路、后路、側路或頸路。
（2）采用“肺癌早期診斷立體定位儀”，對肺部病灶實行三平面交叉立體定位。
2.肺部病灶立體定位
以右上肺病灶取左側臥位、后路穿刺定位為例，介紹穿刺定位有關操作。
（1）體層橫斷面定位（俗稱“上下定位”）：在X線導引下，向上、下方向（患者頭、腳側）移動立體定位儀，依靠橫桿游標金屬標記，標定肺部病灶相對于人體之橫斷面的位置（完成“上下定位”），即確定病灶所處人體的上胸部、下胸部位置。
（2）冠狀面定位（俗稱“前后定位”）：在X線導引下向前、后方向移動立體定位儀的橫桿部游標，依靠其金屬標記，標定肺部病灶相對于人體之冠狀面的位置（完成“前后定位”），即確定病灶所處人體的前胸部、后胸部位置。
（3）矢狀面定位（俗稱：“左右定位”）：根據預先測定肺部病灶距脊柱中線的距離，對應人體左右方向移動該定位儀的立柱游標，行水平向球管X線攝片，依靠立柱游標的金屬標記，標定肺部病灶相對于人體之矢狀面的位置（完成“左右定位”），即確定病灶所處人體一側胸部的左、右位置。這是立體定位穿刺最為關鍵的一步，即確定肺部病灶距檢查臺面高度的水平面。如此，即使病灶因患者呼吸移動，穿刺針在病灶所處同一高度的有效穿刺水平面上仍可隨意跟蹤調整，達到快速準確定性穿刺取檢標本的目的，特別是1cm左右的肺小病灶。
如上即可順利實行肺部病灶三平面交叉立體定位，并可選定與肺小病灶在同一水平面高度的最佳穿刺進針點。側臥位前路穿刺定位、仰臥位側路穿刺定位等方法類同。
3.穿刺獲取標本
（1）標記體表最佳穿刺點，作局部浸潤麻醉。注意麻醉應達胸膜層，以避免少數患者的胸膜過敏反應。
（2）以粗針頭破皮，然后選用合適型號和長度的特制不帶針芯細針，連接30ml特制注射器，在X線導引下迅速刺達病灶。根據刺入時所見到的病灶移動或依靠穿刺針刺入病變時的手感來判斷抵達病灶。囑患者屏住呼吸或盡量保持平靜呼吸，迅即負壓抽吸下將穿刺針在病灶內旋轉或作來回0.5～1cm刺戳提插動作，以期松動組織取得更多標本，負壓抽吸后減壓拔針。強調在病灶內減壓并維持輕微負壓拔針，以注射器針筒內沒有血液為好。
（3）標本立即涂片，放入乙醇乙醚固定液中，送快速染色，并作細胞學檢查。如有條狀小組織塊可送組織病理學檢查。
（4）壓迫穿刺點片刻，以無菌敷料覆蓋包扎。