照高效液相色譜法（2010年版藥典二部附錄ⅤD）測定。
色譜條件與系統適用性試驗
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（28：72）為流動相；檢測波長為245nm。取氫化可的松與潑尼松龍，加甲醇溶解并稀釋制成每1mL中約含5μg的溶液，取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，出峰順序依次為潑尼松龍與氫化可的松，潑尼松龍峰與氫化可的松峰的分離度應符合要求。
測定法
取本品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg的溶液，精密量取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取氫化可的松對照品，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。