(1)原理：氧化酶(即細胞色素氧化酶)，是細胞色素氧化酶系統中的最終呼吸酶。具有氧化酶的細菌，首先使細胞色素C氧化，再由氧化型細胞色素C再使對苯二胺氧化，生成有色的醌類化合物。因此，本試驗結果與細胞色素C的存在有關。
(2)方法：
1)菌落法：直接滴加試劑于被檢菌落上。
2)濾紙法：取潔凈濾紙一小塊，蘸取菌少許，然后加試劑。
3)試劑紙片法：將濾紙片浸泡于試劑中制成試劑紙片，取菌涂于試劑紙上。
(3)結果：細菌在與試劑接觸10秒內呈深紫色，為陽性。無色為陰性。為保證結果的準確性，分別以銅綠假單胞菌和大腸埃希菌作為陽性和陰性對照。
(4)應用：主要用于腸桿菌科細菌和假單胞菌屬的鑒別，前者陰性，而后者陽性。奈瑟菌屬、莫拉菌屬細菌也呈陽性反應。