原理
植物的組織中有一種淀粉磷酸化酶,能利用1—磷酸葡萄糖合成淀粉,生成的淀粉可用I2 —KI染色檢出。
儀器藥品
水浴鍋 研缽
移液管 1%1—磷酸葡萄糖
0.1mol/L檸檬酸 0.2mol/L磷酸緩沖液,pH6.5,(見附表2)。
I2 —KI溶液:溶解1.5g KI于少量蒸餾水中,加入結晶碘0.3g,待溶解后,稀釋成100ml。
操作步驟
1.取馬鈴薯塊莖一個,削去皮,切成小塊,稱取10g,于研缽中加石英砂少許,用10ml 0.1mol/L檸檬酸—0.2mol/L磷酸緩沖溶液研磨成勻漿。
2.用紗布濾取汁液,于3500r/min離心15分鐘,以除去淀粉,即為粗制酶液。
3.取小試管2支,分別加入1%1椓姿崞咸煙—1ml,再于1管中加入1ml粗制酶液,另1管中加入已經煮沸15分鐘的粗制酶液。搖勻試管,立即各吸取1滴于白瓷板上,分別加1滴I2 —KI溶液,測試有無淀粉存在。
4.以后每隔10分鐘,取試管中混合液1滴,檢查淀粉的生成。比較煮沸能否使酶失活?
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