真菌毒素檢測技術新革命——一步法凈化多毒素樣品

近年來，真菌毒素對糧食飼料的污染是一個全球性的熱點問題，不僅以黃曲霉毒素（Aflatoxin），赭曲霉毒素A（Ochratoxin A），單端孢菌毒素（Trichothecenes），玉米赤霉烯酮（Zearalenone），煙曲霉毒素（Fumonisin）和串珠鐮刀菌素（Moniliformin）發生較多，而且真菌毒素種類繁多、結構復雜多樣，這就造成實際生產中，真菌毒素的定量檢測成為困擾我們的重要難題之一，目前的檢測方法包括薄層色譜法、酶聯免疫法、免疫親和柱凈化高效液相色譜法。但薄層色譜法操作繁瑣、污染大、定量差、耗時長；而酶聯免疫法雖操作簡單、靈敏度高，但特異性差，假陽性高；免疫親和柱高效液相色譜法成本太高, 對于高黃曲霉毒素含量的樣品偏差較大。迫切需要一種樣品處理簡便易行、快速準確、靈敏度高、檢測限低，檢測成本低廉的檢測方法和技術。

針對這些檢測難點和問題，長期致力于真菌毒素檢測技術研究的Pribolab經過不懈努力和多次試驗驗證，成功研發出了PriboFast^?系列各類真菌毒素多功能凈化柱和專用凈化柱，將極性、非極性及離子交換等多類基團作為填充劑填充到柱體中，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質,從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用; 系列凈化柱就是采取這種獨特設計原理過柱后將干擾物雜質等截留在柱內填充物,樣液中的毒素不被吸附而直接通過。其顯著特點是，一步就可完成毒素樣品的凈化（操作步驟見下圖）， 30秒左右即完成整個凈化過程，凈化效果理想, 實驗證明，對谷物樣品PriboFast^?系列凈化柱比免疫親和柱回收率還要高，其對所有真菌毒素的回收率均在85－95％； 之二是操作步驟更為簡便，凈化前也不需進行活化、淋洗和洗脫等操作只需直接上樣，有效減少有機溶劑的使用和浪費;其操作明顯不同于免疫親和柱和固相萃取柱（SPE），后兩者凈化樣品至少需要三步 1）將樣品中的待測物吸附到柱上；2）清洗柱上的雜質；3）用有機溶劑洗脫柱子上的待測物。

其中    MFC160多功能凈化柱實現了一步凈化含多類毒素（黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和單端孢霉烯族毒素（包括嘔吐毒素）三類）樣品的目的，過柱凈化后的樣品液可直接用于液相進行黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和單端孢霉烯族毒素（包括嘔吐毒素）三大類毒素含量的檢測，回收率達到90％以上,有效降低單個檢測成本.

總之，PriboFast^?系列真菌毒素凈化柱整個凈化過程樣品處理簡單，操作簡便易行、快速準確、靈敏度高、檢測限低，檢測成本低廉,適合大批量檢測，并能避免氯仿等有毒試劑的使用,在國際上不少試驗室已得到確認，也是得到AOAC的官方認可的檢驗方法。目前在國內的糧油質檢系統、疾控系統和進出口檢驗已廣泛采用這種新的檢測方法，而且實踐證明，這是一種值得推廣和應用的真菌毒素檢測新技術。

注:    MFC160真菌毒素多功能凈化柱（MFC，MultiSep  ）是國家標準 GB/T  5009.23 中使用的 mycosep 226 228MFC柱的改進型，它將極性、非極性及離子交換等多類基團作為填充劑填充到柱體中，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質,從而對毒素樣品中黃曲霉毒素 玉米赤霉烯酮  嘔吐毒素三類毒素起到非常針對性的純化作用，過柱凈化后的樣品可以用于檢測黃曲霉毒素 玉米赤霉烯酮  嘔吐毒素三類毒素，在使用成本大大降低，有效提高就檢測效率。