想了很久，還是決定將LAMP和CPA放在一起進行介紹。主要是因為兩者的引物設計都相對比較復雜，但卻有著比較相似的工作原理，有異曲同工之妙。
LAMP，loop-mediatedisothermal amplification，環介導等溫擴增技術
LAMP是Notomi等于2000年首先提出來的一種新的核酸擴增技術，它針對目的基因的6個區域設計4條特異性引物（包括2條內引物和2條外引物），利用具有鏈置換特性的Bst DNA聚合酶，在65℃條件下高效、快速、高特異地擴增靶序列，CPA，CrossingPriming Amplification，交叉引物擴增技術CPA是2008年由優思達公司獨立研發成功的一種新的核酸恒溫擴增技術，也是中國首個具有自主知識產權的核酸擴增技術。它針對目的基因4或5個區域設計4或者5條特異性引物，利用具有鏈置換特性的Bst
DNA聚合酶、甜菜堿，在63 ℃左右條件下進行高效、快速、高特異地擴增靶序列。根據交叉引物數量的不同，CPA可分為雙交叉擴增（共4條引物=2條交叉引物+2條剝離引物）和單交叉擴增（共5條引物=1條交叉引物+2條剝離引物+2條普通引物）。
6個區域：F1-3, B1-3,其對應互補序列（complementary）F1c-3c，B1c-3c
5’-F3-F2-F1-B1c-B2c-B3c-3’
3’-F3c-F2c-F1c-B1-B2-B3-5’
兩個內引物FIP和BIP
1、上游內部引物FIP的F2序列首先與模板F2c結合，引物上的F1c處于游離狀態，Bst DNA聚合酶的作用延伸合成帶有FIP引物特定序列的互補鏈；2、外部引物F3與模板F3c結合并延伸，置換出新合成的帶有FIP引物特定序列的互補鏈；3、FIP上的F1c與此單鏈上的Fl為互補結構，自我堿基配對形成環狀結構，即形成單啞鈴狀結構模板；4、以此鏈為模板，下游引物BIP和B3，以上一步驟中形成單啞鈴狀結構的單鏈為模板啟動反向新鏈的合成。5、同樣的，新合成的單鏈中B1和B1c互補形成另一端的啞鈴狀結構；這樣就形成的兩端為環狀的啞鈴型單鏈DNA模板結構；5、啞鈴型單鏈DNA模板結構（包括以上步驟中形成的單啞鈴狀單鏈DNA），既可以以自身為模板進行擴增，同時也可以作為引物進行目標靶序列的擴增；6、請記住，只要有游離的3’端存在，就有延伸的可能性。來源：Chukwunonso O. Nzelu, et al. PLOS Neglected Tropical Diseases,November 7, 2019
5個區域：
5’-4s-1s-2s-3s-5s-3’
3’-4a-1a-2a-3a-5a-5’
1個交叉引物
5’-2a-1s-3’
2個剝離引物
4s和5a
2個探針引物
2a和3a
1、交叉引物的1s同目標序列1a互補進行新鏈合成；2、由于交叉引物5‘端的2a游離，會被剝離引物4s在Bst DNA聚合酶作用下進行鏈置換；4、探針引物2a和3a以新置換出來的DNA單鏈為模板繼續合成新的模板鏈，由于5a的存在，可以將以2a和3a為引物合成的新DNA模板進行置換，從而形成多個DNA單鏈模板，同時也可以作為因為引物存在；5、另外，有交叉引物存在，會在同一單鏈DNA中引入互補序列2a和2s，從而系統中會存在1+3單鏈的發夾結構；發夾結構可以在交叉引物存在條件下進行擴增，也可以以2a和3a為引物進行擴增；6、總之，整個反應放大后，或產生2種不同的長度的終產物，即2+1+3+2和2+1+3。來源：Gaolian Xu, et al. SCIENTIFIC REPORTS | 2 : 246 | DOI: 10.1038/srep00246
4個區域：
5’-3s-1s-2s-4s-3’
3’-3a-1a-2a-4a-5’
2個交叉引物：
5’-2a-1s-3’
5’-1s-2a-3’
2個剝離引物：
3s和4a
2、剝離引物3s和4a，同樣在Bst DNA聚合酶作用下進行鏈置換，將利用交叉引物合成的新模板置換出來；3、兩條交叉引物識別帶有交叉引物序列的模板進行擴增，這樣，模板就會不同重復的被延長帶有交叉引物的序列；4、 在同一時間內，可以同時啟動多組DNA合成和鏈置換過程。
2、兩個系統都可以通過內引物（LAMP）和交叉引物（CPA）實現模板的增長；3、兩個系統都使用外圍引物（LAMP的外部引物和CPA的剝離引物）在BstDNA聚合酶下進行鏈置換過程；4、不同點在于引物設計針對的序列排序，導至最終形成啞鈴結還是發夾結構+短的DNA模板。
