與大多蛋白的分離純化方法類似, rEK可通過硫酸銨沉淀、DEAE柱、凝膠層析和透析等方法得到純品, 另外, 運用組氨酸 (Histidine, His) 在蛋白末端進行標記, Nickel金屬螯合柱親和純化這種低成本高效率一步分離蛋白的方法, 也正廣泛地運用到rEK的分離純化, 其收率可達50%以上。對于His-tag的位點, Choi等研究發現rEKL的C末端進行His標記, 用Nickel金屬螯合柱親和純化后其酶活不發生改變, 而在N末端進行His標記后通過Nickel金屬螯合柱則酶活喪失。
生理特點
1939年Kunitz證實腸激酶是胰蛋白酶原的生理激活劑, 而胰蛋白酶是消化系統其它許多酶原的激活劑, 因此腸激酶被認為是消化系統重要的起始酶之一。一般認為EK存在于小腸刷狀源細胞膜上, Zamolodchikova等認為pro-EK是由十二指腸酶激活的。病理研究發現, 十二指腸與胰腺的回流液中富集EK會激活過多的胰蛋白酶原從而導致急性胰腺炎, 而EK缺陷的機體將會有腹瀉、嘔吐、浮腫等癥狀, 造成發育不良, 導致血蛋白不足癥和貧血。