1. 取小試管28支，分四排置于試管架上，每排7支，于每排第一管分別標記H，O，PA，PB 符號。
2. 于各管內加入生理鹽水0.5 mL。
3. 于每排第一管各加入1：10病人血清0.5 ml混勻后。從第一排第1管吸出0.5 ml。
注入第一排的第2管作倍比稀釋，依次稀釋至第6管，并從第6管棄去0.5 ml，第7管為對照。
4. 其他三排按同法稀釋。
5. 每排從第7管開始，由后向前每管加入菌液。第一排各管加0.5 mlH菌液，第二排各管加0.5 ml菌液，第三排各管加0.5 mlPA菌液，第四排各管和加0.5 mlPB菌液。
6. 振搖試管架，混勻上述液體，置37 ℃18～24 h后取出觀察結果。
7. 結果觀察
觀察時先勿振搖，以免凝塊分散。先看對照管，后看試驗管。
凝集程度以"+"，"++"，"+++"，"++++"表示，不凝集以"一"表示。"++++"：完全凝集，管底有邊緣不整齊的膜狀凝集塊，上層液體澄清透明。
"+++"：大部分凝集，凝塊非全部下沉于管底而是稍有鋪，上層液體澄清。
"++"：部分凝集，管底有部分凝集塊，上層液體微混濁。
"+"：小部分凝集，管底有小量凝集塊，上層液體較混濁。
"一"：無凝集，液體呈均勻混濁。
記錄實驗結果及凝集效價。
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