實驗材料 載玻片
試劑、試劑盒 蘇木精染料氫氧化銨伊紅染料
儀器、耗材 水浴鍋培養箱
實驗步驟
1. 將顯影過的載玻片(在玻片架中)放入盛有水的染色盤中。
2. 按編號在染色盤中準備以下各組液體。
(1)蘇木精染液
(2)水
(3)水
(4)0.1% NH4OH
(5)水
(6)水
(7)伊紅染液
(8)95%乙醇
(9)100%乙醇
(10)100%乙醇
(11)二甲苯
(12)二甲苯
(13) 二甲苯
3. 在蘇木精染液中染玻片20~30 s(勿染過深),水中浸泡2次,每次2 min。
4. 快速浸于0.1%氫氧化銨,然后浸入水中。
5. 以水浸洗5 min,然后用伊紅染色20~30 s。 ‘
6. 在同一盛95%乙醇的盤中,浸冼玻片8次,然后,于100%乙醇中浸8次,再置100%乙醇中2 min 使完全脫色,在二甲苯中平衡3次,每次2 min。
圖一、用固片截止固定載玻片示意圖
7. 按基本方案1,步驟5~9操作,進行固片處理。
注意事項
1. 如在0.1%氫氧化銨中浸泡時間過長,放射自顯影乳膠會從玻片上脫離。
2. 如染色過深,可將玻片浸于50%乙醇中,脫色片刻(觀察染料擴散狀況),如染色過弱,可再染色。