實驗概要
掌握蘇木精－伊紅(hematoxylin and eosin, HE)及過碘酸雪夫氏染色(periodic acid-schiff stain，PAS染色)方法。
實驗原理
過碘酸雪夫氏染色：過碘酸是一種氧化劑，它能氧化糖類及有關物質中的1.2乙二醇基使之變為二醛，醛與Schiff氏試劑結合，形成紅色的取代色素而得到定位。PAS染色可顯示糖原、中性黏液物質、基底膜、軟骨、垂體、霉菌及寄生蟲等物質。是廣泛應用的染色方法。在腎小球腎炎時PAS染色可顯示基底膜和系膜區的改變。
實驗步驟
1. 蘇木精－伊紅染色
1) 脫蠟：主要用二甲苯脫蠟。
2) 梯度乙醇水化。
3) 自來水沖洗。
4) 蘇木精染色：水化后的切片放入蘇木精染液中浸5~20min，染細胞核。自來水沖洗3~5min。
5) 1％鹽酸乙醇分化5~30s。自來水沖洗1~3min。
6) 弱堿性水溶液返藍30s~1min。自來水充分沖洗5~10分鐘。
7) 伊紅染色：充分水化后的切片直接入伊紅染色液中，染細胞質5~15min左右。
8) 梯度乙醇脫水。
9) 二甲苯透明。
10) 中性樹膠封片。
2. 過碘酸雪夫氏染色
1) 切片按常規脫蠟水洗，再用蒸餾水洗滌。
2) 0.5%~1％過碘酸水溶液氧化5~10min。
3) 蒸餾水充分洗滌，至少3次。
4) Schiff氏試劑染10~30min。
5) 傾去染液后，直接用亞硫酸沖洗液處理切片3次，每次2 min，以達到分化。
6) 自來水沖洗5~10 min，使之顯現出紅色。然后蒸餾水洗1次。
7) 明礬蘇木精染核，自來水充分洗滌。
8) 95%乙醇及無水乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。
結果判定：PAS陽性物質呈鮮紫紅色，其它組織淡粉紅色，細胞核呈淺藍色。