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  • 發布時間:2019-07-06 23:28 原文鏈接: 藻酸鹽包裹實驗

    1.      將藻酸鈉溶于無菌生理鹽水,終濃度為1.5%;

    2.      收集培養的腫瘤細胞,用無血清的培養基洗滌1次,將細胞沉淀重懸于1.5%藻酸鈉溶液中;

    3.      將上述腫瘤細胞懸浮液用1 ml加樣槍緩慢滴入磁力攪拌的250 mM CaCl2溶液中,形成乳白色的藻酸鹽小珠。繼續靜置于250 mM CaCl2中30 min即可使用。以上操作步驟均在無菌條件下進行;

    4.      將第4次免疫后7天的小鼠用苯巴比妥鈉0.1ml (按100 mg/kg計) 腹腔注射麻醉,小鼠麻醉后置于解剖臺上,切開背部皮膚,皮下植入4粒藻酸鹽包裹顆粒,縫合皮膚,外敷手術膠膜;

    5.      天以后,小鼠經尾靜脈注入100 μl (按100 mg/kg計) FITC標記的葡聚糖(FITC-Dextran);

    6.      20 min后處死動物,取出藻酸鹽顆粒,常溫下加入1 ml的生理鹽水,剪碎研磨顆粒,再加入1 ml的生理鹽水,混勻標本,放置1小時,1500 rpm離心5 min。取上清液用熒光酶標儀測定;

    7.      用不同濃度的FITC-Dextran制備標準曲線。


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