基 本 方 案 1 液體容器中的蛋白質印跡材 料待分析樣品 標準分子質量蛋白質,預 染 型(Sigma 或 Bio-Rad) 或 生 物 素 化 型(Vector labs 或Sigma) 轉移緩沖液 無粉手套 Scotch-Brite 墊 片(3M ) 或類似海綿 Whatman 3M M 濾紙或類似物 轉 移膜:0.45um 硝 酸 纖 維 素 膜(Millipore 或 Schleicher& Schuell), P V D F 膜(Millipore Immobilon P ) ,中 性 尼 龍 膜(Pall Biodyne A ),或者正電荷尼龍膜(Pall Biodyne B ; Bio-Rad Zetabind) 電 印 跡 裝 置(E C 裝置, Bio-R a d 或 Hoefer) 不可擦拭圓珠筆或軟筆芯鉛筆 1.準備抗原樣品,用小型或標準大小單向或雙向凝膠分離蛋白質,上樣時將預染的或生物素化的標準分子質量蛋白質上一道或多道。 2.電 泳 結 束 后 ,拆 除 凝 膠 板 去 除 上 層 膠 ,在 室 溫 下 用 適 量 轉 移 緩 沖 液 將 凝 膠 平衡 30 min。 3 . 準備一個足夠大的盤置放塑料轉移盒,盤中注滿轉移緩沖液將盒覆蓋。 4 . 按 照 圖 12. 5.1 所 示 ,在塑料轉移盒的底部一邊放置 Scotch-Brite 墊片或海綿,再放上一張用轉移緩沖液潤濕的與凝膠同樣大小的濾紙,在濾紙上放上凝膠,用試管輕輕地在凝膠表面卷動以趕走凝膠和濾紙之間的氣泡。 5 . 剪一張兩邊緣比凝膠寬 1?2m m 的轉移膜,將硝酸纖維素膜和尼龍膜呈 45°角慢慢放





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