蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶，具有很高的比活性，是DNA提取的關鍵試劑。
該酶在較廣的pH范圍（4?12.5）內及高溫 (50?70°C)均有活性，用于質粒或基因組 DNA、RNA的分離。
在DNA提取中，主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白，使 DNA游離在溶液中，隨后用不同方法進行抽提，除去雜質，收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋白酶K貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。
貯存于-20°C。蛋白酶K溶液為無色透明，如出現沉淀就不能再使用。