酵母菌的培養和觀察實驗方法與步驟

目的 認識酵母菌 的形態特征，了解培養酵母菌的方法。

實驗前的思考 人類認識和利用酵母菌的歷史悠久，早在史前時期，先人們就學會釀酒。約在6000年前，就發明發面的方法。直到十九世紀有了顯微鏡 ，人們才窺探到醉母菌的真面目。對酵母菌做純系培養分類研究的是與巴斯德同時代的丹麥人漢斯，他是為尋求釀造高品質啤酒的途徑才去深入研究酵母菌的。

材料器具 甜酒釀汁液，新鮮酵母 ，豆芽;顯微鏡，載玻片，蓋玻皮，玻璃棒，鑷子，滴管，吸水紙，酒精燈，石棉網，火柴，漏斗架，玻璃斗，量杯，三角燒瓶，燒杯，天平，量筒，棉絮;蔗糖，乳酸，碘液。

步驟

1.觀察酵母菌

(1)用滴管從甜酒釀的汁液中吸取一滴汁液，滴在載玻片上，用針攤開，蓋上蓋玻片，在低倍鏡下就能清楚地看到甜酒釀的汁液中懸浮著無數酵母菌。再換高倍鏡仔細觀察一個酵母菌，可以看到酵母菌是橢圓形的單個細胞，細胞中有許多小顆粒，也有幾個大的液泡(圖示)。有的酵母菌的一端長出大小不同的突起，這是酵母菌的芽體。芽體成長脫落，就成為新的個體，有的芽體在從母體脫落前又長出突起。這種繁殖方法叫出芽繁殖。

(2)在蓋玻片一邊加一滴碘液，從另一邊用吸水紙把染液引入蓋玻片下。不久就能看到被染成棕褐色的細胞核和變成藍紫色的淀粉粒。

2.培養酵母菌

(1)用蔗糖液培養 在盛有100毫升的三角燒瓶里加5克蔗糖，煮沸。等到溶液稍稍冷卻，加一小塊鮮酵母，用玻璃棒攪拌均勻;再用棉絮塞緊瓶口。然后把燒瓶放在 25～30℃的溫暖地方，數小時后就可見到溶液里有氣泡產生，并散發出酒味。這是因為酵母菌正在把糖分解成乙醇和二氧化碳。

(2)二三天后吸取溶液在顯微鏡下觀察，就可看到已培養出大量酵母菌。

注意事項

1.觀察酵母菌時，視野里雜質較多，有淀粉粒、半分解的淀粉團塊、曲霉孢子和其他雜菌等等，只要掌握住酵母菌的形狀和體內具有液泡，尤其是染色后體內具有褐色的核和藍色的淀粉粒這些特點，就可以跟其他雜菌區分開來。

2.發酵在缺氧的環境里仍能良好地進行，不必為了增加氧氣去攪拌已放入菌種的培養液。

分析和討論

酵母菌是少數能在缺氧環境里生存較長時間的一種微生物，它屬于兼性菌類。在一般情況下進行有氧呼吸。如環境中有豐富的糖類，它進行缺氧呼吸。其過程如下：

1.C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O+2.87×103兆焦(有氧呼吸)

2.C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+109×103兆焦(缺氧呼吸)

建議 培養酵母菌還可以采用下列兩種方法。

1.用乳酸、豆芽汁和蔗糖液培養

(1)取10克豆芽放入100毫升水中，加熱煮沸半小時，盛起，用細布過濾。在濾液里加5克蔗糖和5毫升乳酸，配成液體培養液。

(2)把鮮酵母半塊或老面(發酵后晾干的面粉團)打碎，投入培養液中，放在黑暗溫暖的地方，二三天后就可以培養出大量酵母菌。

2.用巴斯德培養液培養

酵母菌需要的無機營養來自外界環境。如果在培養液內適當增加氮、磷等元素，效果會更好。巴斯德培養液的配方如下：

蔗糖15克，碳酸銨1克，磷酸氫鉀0.2克，磷酸鈣0.02克，硫酸鎂0.02克，蒸餾水100毫升，培養方法跟上述的相同。