• <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
  • <table id="ommkm"><option id="ommkm"></option></table>
  • <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
    <rt id="ommkm"><option id="ommkm"></option></rt>
  • <noscript id="ommkm"></noscript>
  • 發布時間:2019-04-30 21:55 原文鏈接: 酵母遺傳學方法4:質粒DNA的羥基突變

    質粒DNA的羥基突變

    1.臨用之前制備羥胺溶液,置冰上待用。

    2.將用氯化銫純化的10μg質粒DNA加到含500μl羥胺溶液的微型離心管。

    3.37℃下培養20小時。

    4.加入10μl5mol/L NaCl50μg 1mg/ml的牛血清蛋白(BSA)和1ml無水乙醇終止反應,置-70℃沉淀DNA10分鐘。

    5.離心10分鐘,小心棄去所有上清液,收集DNA

    6.DNA懸浮于100μl TE緩沖液(pH8)中,再加入10μl 3mol/L的醋酸鈉和250μl的無水乙醇,在-70℃下放置10分鐘,重復步驟5,收集DNA

    7.讓沉淀自然干燥,再懸浮于100μl TE緩沖液(pH8)。

    8.DNA可直接用于大腸桿菌或酵母的轉化。誘變DNA與非誘變DNA相比,酵母的轉化頻率相對降低約3倍。在大腸桿菌中,Ura質粒可被檢出。


  • <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
  • <table id="ommkm"><option id="ommkm"></option></table>
  • <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
    <rt id="ommkm"><option id="ommkm"></option></rt>
  • <noscript id="ommkm"></noscript>
  • 国产精品单位女同事在线