反相填料的特性
反相填料的特性取決于鍵合相設計的許多不同參數和不同填料的具體生產過程，這點是無疑的。要把大量的數據聚集成對色譜工作者有用的信息，很重要的事請是要注意不同填料之間的相對應的特性。反相色譜填料有兩個最主要的特性參數。一個是疏水性，可以很容易的通過純的疏水性被分析物的保留因子來量度；另一個是硅醇基的活性強度，這最好通過一個相對保留值來量度：被分析物在疏水作用力和與硅醇基的作用力兩者之間的作用對被分析物單純受疏水作用力。對許多C8和C18的填料已經做過這樣的測量，在這里或其他地方可以找到測量結果。下表清楚的總結了這些結果。（表略）X軸表示填料的疏水性，Y軸表示填料的硅醇基活性。疏水性的增加主要決定于碳鏈的長度。因此你會發現表的左邊主要是C8填料而右邊是C18。硅醇基的活性是在pH中性條件下測得的。填料用高純度的硅膠基質并進行了有效的封端的填料硅醇基的活性小，可以在表的下方找。在Y軸上方，你能找到硅醇基活性高的填料。這通常是因為硅膠純度不夠高和/或是沒有封端，這些填料有著不同的選擇性，但它們常表現為在pH中性的流動相條件下對堿性被分析物產生拖尾。你可以從下表選出最適合你的分離要求的一種填料。如果你的被分析物是堿性的并且顯示出與硅醇基有很強的作用，選擇圖中較下方的填料。如果你選擇一種極性選擇性差異明顯的，你應該從表中不同部位選擇。如果你簡單的要找疏水性不同的，使用在疏水性軸上彼此差距較遠的填料。
重現性
時間是重現性的測驗。有主要供應商生產的填料，許多都有較好的批間重現性，即使是在很長的一段時間里。（以下略）
顆粒大小
表示和量度
顆粒大小用微米做單位，并且指的是填料顆粒的平均直徑。可以用許多的技術來測量并有不同的表示方法。對于不規則的填料，不可能定義一個“直徑”。標示的直徑是測量技術定義的等價的球直徑。
通常使用的HPLC填料有一個粒度分布。表示的顆粒直徑可以是體積平均值或是數字平均值。因此很難比較不同生產商生產的填料的粒度。如果使用相同測量方法和直徑定義，填料的標示直徑為5微米的，可能實際值在4到6.5微米之間。粒度的實際測量最終要用填料的滲透性來評價（標準化反壓）。
不同填料的比較
平均顆粒大小對兩個因素有影響。第一個是操作時的柱反壓。反壓與填料的直徑的平方成反比。第二個是分離效率。固定柱長度，填料粒度越小柱效越高，因為擴散路徑越短。在相同的柱長和流速的情況下，一根填的好的3微米填料的柱子分離度比5微米的高一倍，但代價是反壓是5微米填料柱子的4倍。
現在，流行的是5微米的填料。這樣的粒度相同的分析時間內比10微米的分離效能好，反壓也合適。用3微米填料的短柱子越來越流行，因為相同時間內分離效果比5微米的高。以前用3微米填料的柱子壽命短，但現在的技術已經可以達到提高柱效有不縮短壽命。
3μm
用于快速分析。如果你使用技術水平高的填料將可以提高速度而又獲得高柱效又不會縮短柱壽命。
5μm
用于常規的分析。既有高的分離效能柱壓也可接受。
10μm
曾經是分析應用的標準填料粒度，10μm的填料以較一般的效能可以得到較好的峰分離，即使是長柱。這類填料現在主要用于常規的QA方法或是分析方法放大到制備應用的嘗試。
〉10μm
主要用在制備。今天，球形的制備填料范圍增大了，但最大達到20μm。超過20μm的只有不規則填料。
選擇柱內徑
柱長與顆粒大小
柱長、柱內徑和柱體積
譯自Waters Chromatography Columns and Supplies Catalog 1999-2000