如果是測序引物的話,因為目前的測序技術一端只能到800bp左右,所以一對引物差不多能測1.5kb左右的片段,超出這個范圍測出來的也不太可信了。所以如果你的目的片段在這個范圍內,設計1對引物就行了,如果超出這個范圍,比如說有6k左右,那就要設計四對引物,設計方法跟常規的一樣,只是把握這個間隔就好了。1.5kb左右設計前后一對引物。最好相鄰的測序片段之間存在overlap,這樣就好最后組裝在一塊兒