七、黃曲霉毒素檢測——“免疫親和柱法”方法簡介
為了開發一種簡單、快速、靈敏、準確的分析方法,美國 VICAM(維康)公司與哈佛大學、麻省理工學院、約翰－霍普金斯大學、AOAC、FDA、FGIS、美國農業部等著名大學和政府機構通力合作，發明研制了一系列以單克隆免疫親和柱為分離手段，用熒光計、紫外燈作為檢測工具的分析方法。
該項技術有一下特點：
1、 認證機構廣泛，通用性強（見第六項）
2、 分析速度快，一個樣品只需 10－15分鐘，其他傳統的方法要做到定量分析需要幾小時至幾天的時間。
3、 靈敏度高，測定范圍廣泛（0－300ppb）,用熒光計可以測定 0.1ppb 的黃曲霉毒素 M1，用 HPLC可以檢測出 10ppt 的黃曲霉毒素 M1。
4、 采用單克隆免疫技術，可以特效性地將黃曲霉毒素和其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強。
5、 儀器輕便容易攜帶，自動化程度高，操作簡單，直接讀出測試結果，對實驗操作人員要求不高，可以在小型實驗場所使用。
6、 不需要劇毒的黃曲霉毒素和其他真菌毒素標準物來標定，所以在整個實驗過程中，絕對安全可靠。 目前，美國花生農場主、加工廠、官方檢測機構 90%以上均采用維康技術分析黃曲霉毒素，維康技術在全世界 110 個國家和地區得到了廣泛的應用。
在中國的典型用戶有：檢驗檢疫系統（山東、威海、日照、臨沂、石島、濰坊、天津、塘沽、河南、遼寧、大窯灣、錦州、唐山、北京、汕頭、安徽、上海、廈門、平涼、嵐山、湖北、廣州、珠海），CDC（北京、上海）、質檢系統（上海、山西、濰坊、淄博、西安、哈爾濱），國家飼料檢測中心（北京）、國家糧油檢測中心（北京）、成都糧科所、天津農科院、農業部農產品檢測中心（新疆）、上海獸醫站、李錦記（廣東）、遼寧糧油外貿、山東華盛、東海糧油、安徽弘安、長生植物油、宏大油脂、文登糧油、文登昆俞、日照東方、日照東盛、日照中谷糧油、日照糧油、日照東粵、日照亞泰、五蓮糧油、興安糧油、莒縣山孚、莒縣糧食局、日照海納、日照盛康、莒縣春園、煙臺平孚、煙臺楓林、煙臺金陵、水道糧管所、煙臺大成、煙臺大江、煙臺新瑞、煙臺天府、煙臺澳華、招遠糧油、萊陽魯花、榮成副食品、中孚糧油、威海正昌、宏昆食品、威海華隆、威海黃海、潤德糧油、青島佳安、青島佳德、青島佳景、青島東方、青島興華、青島金華、青島銳盛、青島盛德、萊西花生、萊西松旺、膠州恒升、
膠州供銷、臨沂裕隆、莒南花生協會、莒南優盛、莒南正大、莒南四海、沂水寶盛、臨沂天望、臨沂綠地、臨沂中盛、諸城糧油、諸城供銷、安丘外貿、唐山南光、唐山天申、廊坊普瑞納、鎮江嘉吉、嘉興嘉吉、上海味好美、同仁堂等，（煙臺、濟南、廣東、寧波、吉林、山西、黑龍江、河北、江蘇、淮安、福建和甘肅檢驗檢疫局、SFDA、上海藥檢、深圳南山 CDC、廣東 CDC、上海 SGS、醫科院藥植所、天津雀巢、商檢所、浙大飼料所、大連質檢、遼寧質檢、臨沂質檢、日照質檢、青島通標、青島嘉里、河南農科院、湖北綠色產品檢測中心使用的是親和柱+HPLC法）。
可以檢測的樣品包括：大米、面粉、醬油、植物油、醋、牛奶、奶制品、花生、花生醬、花生油、核桃、胡桃、杏仁、咖啡、玉米、蜂蜜、谷物、高粱、大豆、醬、蔬菜、胡椒、辣椒、中藥材、煙草、啤酒、小麥、棉籽、燕麥、飼料等。
八、可以測試的其他真菌毒素
該種方法適用廣泛，利用同一臺儀器和相似的分析方法還可檢測出赭曲霉毒素，伏馬毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、T-2 毒素及橘青霉毒素等。
快速、準確的檢測食品中的真菌毒素
黃曲霉毒素免疫親和柱分析法(IAC-AFLATEST)是美國維康(Vicam)公司的ZL技術,1994 年被AOAC(美國公職分析化學家協會) 批準為最新的官方方法(編號為：991.31)，同時，它也是美國農業部聯邦谷物檢測中心(證書編號為：FGIS91-103-13),IUPAC(國際純粹與應用化學協會)US-FDA(美國食品藥品行政署)和 USDA(美國農業部)認證的官方方法.經山東商檢局科技工作者的努力,黃曲霉毒素免疫親和柱分析法(IAC-AFLATEST)已經被制定為中國出入境檢驗檢疫局(CIQ)新的行業標準。
以前，黃曲霉毒素分析一般采用薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)和酶聯吸附免疫法(ELISA)。TLC 雖然簡便，但靈敏度差；HPLC 雖然靈敏度高，但樣品處理煩瑣，操作復雜，儀器昂貴.ELISA 重復性差試劑壽命短需要低溫保存。此外，這些方法都有共同的不足之處：
（1） 在操作過程中，需要使用劇毒的真菌毒素作為標定標準物，有對操作人員造成巨大沾污的危險。
（2） 在對樣品進行預處理過程中，需要使用多種有毒、異味的有機溶劑，不僅毒害操作人員，而且污染環境。
（3） 操作過程煩瑣、時間長，勞動強度大。
（4） 儀器設備復雜、笨重，難以實現現場快速分析。
（5） 靈敏度較差，無法滿足歐盟等國的標準要求。
為了開發一種簡單、快速、靈敏、準確的分析方法,美國維康(Vicam)公司與哈佛大學、麻省理工、約瀚-霍普金斯大學、AOACFDA、FGIS、美國農業部等著名大學和政府機構通力合作，研制發明了一系列的以單克隆免疫親合柱為分離手段,用熒光計,紫外燈作為檢測工具的分析方法.維康技術具有如下特點:
1) 是 AOAC(美國職業分析家協會)、IUPAC(國際純粹與應用化學協會)、USDA-FGIS(美國農業部聯邦物谷檢測中心)、USDA-GIPSA(美國農業部谷物檢測、包裝、貯存行政署)認證的官方方法，其檢測結果在世界各地均能得以認可。
2) 分析速度快，一個樣品只需 10-15 分鐘，而其它傳統方法均需要幾個小時至幾天時間。
3) 靈敏度高，測定范圍寬(0.1-300ppb)，用 HPLC 檢測可以測定 10ppt 的黃曲霉毒素 M1。
4) 采用單克隆抗體免疫技術,可以特效性地將黃曲霉毒素或其它真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高,正確性和可靠性強。
5) 儀器設備輕便容易攜帶,自動化程度高,操作簡單,直接讀出測試結果,高中文化水平者即可勝任,可以在小型實驗室或現場使用
6) 不需要劇毒的黃曲霉毒素及其它真菌毒素標準物來標定,所以整個試驗操作過程中,絕對安全可靠。
7) 利用同一臺儀器和相似的分析方法，還可以檢測赭曲毒素、伏馬毒素、玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON 或稱嘔吐毒素）、T-2 毒素和橘青霉毒素。
序號 描述 定貨號 序號 描述 定貨號
1 4系列熒光計 G8000 13 甲醇分配器 20501
2 槽紋濾紙 31240 14 打印紙 G8100
3 一次性塑料漏斗 36020 15 一次性塑料移液器 20652
4 一次性塑料燒杯 36010 16 500ml 洗瓶 20700
5 不銹鋼均質器 20200 17 一次性測試管 34000
6 玻璃混合器 20300 18 Kim-wipe 紙 31967
7 泵流操作架 21020 19 顯色液分配器 20600
8 500ml 量筒 20501 20 實驗操作指南錄像帶
9 微纖維濾紙 31955 21 英文實驗操作手冊
10 50毫升量筒 20600 22 試管架 21010
11 顯色液 32010 23 標準物 33020
12 電子稱 20100 24 玻璃注射器 34010