2011年激光共聚焦掃描顯微學最新進展學術研討會在京召開

　　2011年3月29日，由北京理化分析測試技術學會和北京電鏡學會主辦的的北京市2011年度激光共聚焦掃描顯微學最新進展學術研討會在北京北科大廈成功舉行。本次研討會以推動激光共焦掃描顯微學的進步和發展，促進其在生命科學等領域中的應用和發展為目的。邀請來自北京大學、中醫科學院、生物物理所及北大醫學部等科研院所的專家學者作前沿學術報告。來自PE公司、徠卡儀器、奧林巴斯（中國）有限公司、英國安道爾、尼康儀器的應用工程師紛紛介紹其最新產品技術。

2011年激光共聚焦掃描顯微學最新進展學術研討會現場

　　本次研討會由來自北京市電鏡學會的理事長張德添教授主持，張教授首先歡迎大家的到來，簡單介紹了激光共焦距顯微鏡在我國的發展情況，隨后宣布研討會開始。

北京市電鏡學會的理事長 張德添教授

大會報告

北京大學 陳建國教授

　　來自北京大學的陳建國教授做了題為《CEP57與紡錘體行為》的報告。陳教授在報告中主要介紹了一種中間體蛋白Cep75與紡錘體行為的關系。Cep75 作為中心體外圍物質參與中心體處微管組裝，它的表達量降低會導致紡錘體微管網絡結構異常，產生了包括染色體赤道板排列延遲和多級紡錘體。同時Cep75作為中間體組分會參與胞質分裂過程。Cep75缺失可以造成中間體微管網絡結構疏松，微管成束過程受阻。

徠卡儀器有限公司 王怡凈博士

　　徠卡儀器有限公司的王怡凈博士作了《徠卡分辨光譜共聚焦技術》的報告，介紹了徠卡的一款新產品——Leica TCS SP5 X ，是共焦顯微鏡學的一個創新。王博士主要從激光光源、分光器和檢測器三個方面介紹了本款產品。

　　激發光源：這款產品配置的是白光激光，可自由選擇激發譜線，能最優化激光波長，最大程度減少串色，激發范圍470-670nm。由于是單一激光提供全光譜激發譜線，具有維護費用低，可靈活調節等優點。分光器：徠卡采用AOBS聲光分光器，透光率非常好，可針對任何的激發光和發射光譜。檢測器：Leica TCS SP5 X 采用HyD混合檢測器，同時具備PMT和APD的優點（大動態范圍和高靈敏度），GaAsP作為陰極，采到的圖像信噪比好，可用于光子計數。另外，Leica TCS SP5 X 的所有重要光學部件都可自由調節。

　　最后，王博士通過一些實例展示了Leica TCS SP5 X 在實際應用中的貢獻，如可用新的波長進行高質量成像、可進行激光光譜掃描，選擇最適激光波長及可進行激發-發射光譜掃描等。

中醫科學院 王毅博士

　　中醫科學院醫學實驗中心的王毅博士作了題為《光學成像技術在中醫藥研究中的應用》的報告。

　　王博士首先介紹了中國中醫科學院醫學實驗中心，概述了光學及電子成像設備在中醫藥研究領域的應用。主要介紹了光學成像技術在中藥注射劑過敏性物質篩查和腫瘤轉移中的應用兩個方面的內容。

　　中藥注射劑的不良反應是藥品安全性評價中的一個熱點問題，其中以急性過敏反應最常見。肥大細胞脫顆粒實驗是篩選過敏反映原的最主要工具細胞。可以用激光共聚焦顯微鏡觀察肥大細胞脫顆粒時細胞內鈣離子變化的時相過程，建立動態評估模型。這種方法克服了傳統方法的不足，具有廣泛的應用價值。另外，王博士還介紹了腫瘤細胞的動態測量方法，通過活細胞工作站觀察腫瘤細胞的動態，具有減少手工操作誤差、拍圖速度快，全自動，受外界干擾小、所得圖像可進行定量測量等優點。

英國安道爾科技有限公司 王桂龍工程師

　　 英國安道爾科技有限公司的王桂龍工程師作了《轉盤式共聚焦顯微鏡在活細胞領域的新技術及應用》的報告。Andor 公司成立于1925年，是一個科學圖像和光譜解決方案供應商。用于高速活細胞共焦領域的主要有Andor Revolution DSD和Revolution XD兩款共聚焦顯微鏡系列。

　　Revolution特殊的激光共聚焦雙渦輪盤技術提供了一個高速、高信噪比成像、低光漂白和光毒性的理想平臺。Andor全球領先的iXon系列單光子探測器，結合Yokogawa獨有ZL技術的Nipkow雙轉盤激光共聚焦掃描單元CSU-X1, Revolution系統能夠達到每秒鐘2,000幅共聚焦圖像的幀速。

　　Andor Revolution系統以Andor iCam技術為核心，對活細胞或組織動態過程或極度光敏感過程的3D（x、y、z），4 D（x、y、z、時間），5 D（x、y、z、時間、多波長），6 D（x、y、z、時間、多波長、位置）進行實時記錄和觀察，能夠滿足多學科及交叉學科研究中的各種需求。

奧林巴斯（中國）有限公司 齊冬工程師

　　奧林巴斯（中國）有限公司的齊冬工程師作了《活細胞分子擴散測量的共聚焦解決方案》的報告。

　　共聚焦一般成像和活細胞成像沒有辦法得到分子擴散信息。通過熒光關聯譜（FCS）可總結分子熒光的變化規律，得到下列信息：分子量信息、分子濃度、胞內動力學、胞間環境和分子相互作用等。

　　熒光互關聯譜（FCCS）是FCS的延伸，可以總結分子間的動態相互作用，屬多通道檢測技術，FCCS具有檢測靈敏度高、對樣品無損耗、分析速度快等優點。

　　光柵掃描圖像相關光譜（RICS）用于區域研究，可測量細胞內任意區域的擴散情況。在激光掃描中既包含位置信息也包含時間信息。

中國科學院生物物理所 王晉輝教授

　　中國科學院生物物理所的王晉輝教授作了《雙光子共聚焦顯微鏡在活體動物腦功能研究中的應用》的報告，主要介紹了雙光子激發原理、雙光子顯微鏡的歷史及其在生物醫學領域的應用。

　 　1931年，諾貝爾獎得主Goppert-Mayer的博士論文為雙光子激發技術奠定了理論基礎。雙光子激發技術，就是采用較高功率的超短脈沖 （10-13秒）的激光激發熒光物質，使之躍遷到激發態時能同時吸收兩個光子，卻發射一個光子，所以可以使用波長比發射光波長還長的激發光。波長較長的激 發光能量較低，對樣品的光損傷和光漂白也明顯變小。這是雙光子激發的優點之一，雙光子激發的另一個優點是雙光子激發技術本身能產生共聚焦效應。

　 　1990年，康乃爾（Cornell）大學的Denk 與Webb等人將雙光子激發技術應用于激光掃描熒光顯微鏡，發明了"雙光子顯微鏡"，基于雙光子激發技術的雙光子顯微鏡在細胞生物學領域有很多應用。王教 授從以下幾個方面介紹了雙光子顯微鏡的應用：神經網絡的成像；管狀結構里的神經元和星細胞的成像；鈣成像與電生理系統結合應用；功能障礙-癲癇神經元網絡 等等。

尼康儀器（上海）有限公司北京分公司 薛志紅工程師

　 　來自尼康儀器的薛志紅工程師作了《洞察細節——SIM超高分辨率成像技術及應用》的報告。主要介紹了Nikon新推出的超高分辨率熒光顯微鏡（N- SIM）。這款顯微鏡采用California大學的結構照明顯微術（Structured Illumination Microscopy ，SIM）以得到更高的分辨率，可觀察到微米級及納米級的結構。此外，還具有許多其它特性，如0.6秒/幀的快速掃描，及與TIRF聯合的TIRF- SIM照明技術，這一技術可以得到比傳統TIRF更高的分辨率及更為精細的細胞膜區域結構信息。

珀金埃爾默（上海）有限公司 焦磊工程師

　 　珀金埃爾默（上海）有限公司的焦磊工程師作了《新技術下的3D活細胞共聚焦成像分析系統》報告，主要介紹了Perkin Elme 新推出的一款 Ultra VIEW VoX 高速激光共聚焦實時成像系統。 三維活細胞成像是激光共聚焦顯微鏡技術方面發展最迅速的領域。Ultra VIEW VoX 是一項完整的 3D 活細胞成像解決方案，融入了最新研發的轉碟技術。實現了高速、高分辨率的活細胞成像。

　　Volocity 軟件是一款可用于顯現、測量、跟蹤、繪制和發布異常 4D 多通道圖像的先進軟件。Ultra VIEW VoX 配合功能強大的Volocity 軟件，可在第一時間進行圖像數據的分析處理。

北大醫學部 何其華老師

　 　北大醫學部的何其華老師介紹了《Confocal使用及樣品制備中常遇到的問題和解決方法》，報告分為兩個部分，首先，何老師通過果蠅和斑馬魚等實例介 紹了雙光子掃描顯微鏡的應用；隨后從固定樣品制備的問題（免疫熒光），活細胞（活組織）樣品制備中的問題，共定位、定位及定量的問題等三個方面介紹了樣品 制備中常遇到的問題和解決方法。

　　報告會后，與會專家和各廠商工程師進行了自由討論，最后張教授宣布會議圓滿結束。