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  • 發布時間:2021-10-22 09:39 原文鏈接: PCR只有引物二聚體的條帶,沒有目的基因條帶

    如果實驗目的只是基因型鑒定,對PCR產物無其他要求的話,二聚體并非不能忍受,可以嘗試以下方法優化反應條件:
    1.確定DNA模板為陽性,即確定含有目標序列;
    2.對退火溫度設置溫度梯度,瓊脂糖電泳檢測是否有目標條帶,即使可能并不清晰;
    3.選取最清晰的溫度,在PCR體系中設置鎂離子濃度梯度,選取最理想的條件。
    如果是以前曾經成功擴增、現在條件一樣卻沒法重復的,個人經驗要特別注意下模板DNA的質量、尤其是PH值。另外由于不清楚您實驗的細節、所用試劑和反應條件,如有誤解還請見諒...

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