TFA問題
TFA在緩沖液中是不是只起到調節pH的作用呢？TFA的濃度越高基線的漂移越厲害，那是不是說它的濃度在緩沖液pH允許的情況下越低越好呢？（1）TFA起到類似離子對的作用，一般濃度在0.05-0.1%，過高的濃度，會使溶液偏酸，長時間使用可能影響柱子壽命。（2）同時TFA可以抑制硅膠表面硅醇基，改善堿性化合物的峰型。有時0.1%TFA分離不好的話。可以考慮加大濃度到0.2%。但要注意用完后及時沖洗色譜柱。（3）走梯度時，因為走成基線漂移，但對制備的影響不大。......閱讀全文
簡述黃曲霉毒素M1的高效液相色譜法檢測分析原理
用C18柱抽提純化樣品中的AFM1，乙醚對C18柱洗滌，再用CH2Cl2-乙醇洗脫AFM1，然后加入三氟乙酸（TFA）對AFM1進行衍生化處理，利用液相色譜熒光檢測器檢測，并與標準AFM1-TFA的衍生物比較，進行定性、定量分析。
概述多肽的合成過程
1、除去保護 Fmoc保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑（piperidine）去除氨基的保護基團。 2、激活和交聯 下一個氨基酸的羧基被一種激活劑所激活。化學工藝常用HBTU/HCTU/HITU/HATU+NMM/DIPEA或HOBT+DIC作激活劑，激活的單體與游離的氨基反應交聯，形成
高效液相色譜之高效反相液相色譜（一）
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色
關于多肽的合成過程介紹
除去保護 Fmoc保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑（piperidine）去除氨基的保護基團。 激活和交聯 下一個氨基酸的羧基被一種激活劑所激活。化學工藝常用HBTU/HCTU/HITU/HATU+NMM/DIPEA或HOBT+DIC作激活劑，激活的單體與游離的氨基反應交聯，形成肽鍵。在
反式脂肪酸的檢測前景
TFA是一種不可忽視的具有危害的不飽和脂肪酸，且與人類日常生活聯系密切，廣泛存于諸如早餐麥片、面包、咖啡、蛋糕、油炸松脆食品、冷凍食品、方便湯、巧克力、沙拉醬及各類糖果中。且導致多種人類疾病，引起各國學者的關注。2015年6月，美國食品和藥物管理局宣布，3年內禁止在食品中使用人造反式脂肪，以助
蛋白質和多肽反相HPLC分析和純化指南（十四）
蛋白質/多肽液相分析中的流動相選擇有機溶劑可將吸附在疏水界面的蛋白質洗脫（圖14）。在梯度洗脫期間，當有機溶劑量達到針對每一蛋白質的特定濃度時，蛋白質就會從疏水界面上解吸，繼續順著柱向下，從而從柱中洗脫。 圖14. 當有機改性劑的濃度達到特定值時，蛋白質從疏水界面洗脫。乙腈。在多肽的反相色譜分離時最
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重復添加的過程，通常從C端向N端(氨基端)進行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接，再以該氨基酸N端為合成起點，經過脫去氨基保護基和過量的已活化的第二個氨基酸進行反應，接長肽鏈，重復操作，達到理想的合成肽鏈長度，最后將肽鏈從樹脂上裂解下來
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重復添加的過程，通常從C端向N端(氨基端)進行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接，再以該氨基酸N端為合成起點，經過脫去氨基保護基和過量的已活化的第二個氨基酸進行反應，接長肽鏈，重復操作，達到理想的合成肽鏈長度，最后將肽鏈從樹脂上裂解下來，分
Cyanogen－Bromide－digestion－of－protein
1. Proteins are TCA precipitated and washed with acetone, then dried.2. The CNBr should be brought to room temperature in the hood and used ONLY in th
雜化顆粒C18色譜柱和乙酸流動相進行肽的高載量研究－二
數據管理MassLynx軟件4.1版結果與討論含有九種組分的肽混合物的載量研究在之前的研究中，已經對CSH130 C18和BEH130 C18在分析型肽分離中的應用(例如肽圖繪制)進行了廣泛的探討8-9。簡而言之，與其他肽分離反相填料相比，CSH130 C18及其創新的表面帶電技術能夠改善峰形和載量
實驗室分析方法氣相色譜酰化衍生化方法
酰化能降低羥基、氨基、巰基的極性,改善這些化合物的色譜性能,并提高這些化合物的揮發性,增加某些易氧化化合物的穩定性。當酰化時引入含有鹵離子的酰基時,還可以提高使用ECD檢測器的靈敏度。常用的酰化試劑有酰鹵、酸酐和反應活性的酰化物。(1)乙酰化法:標準乙酰化法是將樣品溶于氯仿中,與乙酸酐和乙酸在50℃
氣相色譜酰化衍生化方法簡介
酰化能降低羥基、氨基、巰基的極性，改善這些化合物的色譜性能，并提高這些化合物的揮發性，增加某些易氧化化合物的穩定性。當酰化時引入含有鹵離子的酰基時，還可以提高使用ECD檢測器的靈敏度。常用的酰化試劑有酰鹵、酸酐和反應活性的酰化物。 （1）乙酰化法：標準乙酰化法是將樣品溶于氯仿中，與乙酸酐和乙酸
制備型液相色譜儀的操作經驗
制備型液相色譜儀的分離目的是從混合物中得到純物質。為了縮短分離時間和提高分離效率，制備型液相色譜的的進樣品量很大，導致色譜柱的分離負荷相應加大，因此必須加大色譜柱填料，增大柱內徑和柱長，使用的流動相相對增多。然而，當色譜柱上的樣品負載加大時，往往會導致柱效急劇下降而得不到純產品。制備型液相色譜要解
蛋白質和多肽MALDIMS分析方法
ABSTRACTFor MALDI-TOF-MS analysis of proteins and peptides, samples are cocrystallized with an excess of organic matrix that absorbs at a specific wav
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重復添加的過程，通常從C端向N端(氨基端)進行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接，再以該氨基酸N端為合成起點，經過脫去氨基保護基和過量的已活化的第二個氨基酸進行反應，接長肽鏈，重復操作，達到理想的合成肽鏈長度，最后將肽鏈從樹脂上裂解下來
HPLC故障排除：峰形問題（一）
1. 峰形1.1.在RP-HPLC應用之初，峰拖尾就是最常見的峰形問題（拖尾峰是RP-HPLC自出現以來最普遍的峰形問題）。大多數峰拖尾是由于柱內硅膠顆粒表面上的酸性或離子化硅烷醇基團之間相互作用而導致的。低純度硅膠（通常稱為“A型”或酸性硅膠）具有高含量的酸性硅烷醇（-Si-OH）基團，其富含的金
精度0.1mg量程210g萬分位天平
產品特性：5寸彩色觸摸屏，顯示清晰直觀，人機對話界面，操作更簡便；全自動時間觸發內部校準，可選自動內校時間，支持鍵校準；新代電磁力平衡式傳感器，稱重快速穩定；特制精澆鑄鋁外殼，全面提升天平的防靜電抗干擾能力；三開門玻璃防風罩，超大操作空間，視覺通透，操作方便；新增密度、稱重百分比功能。產品配置：全自
蛋白質和多肽反相HPLC分析和純化指南（十二）
蛋白質/多肽液相分析中的流動相選擇有機溶劑可將吸附在疏水界面的蛋白質洗脫（圖14）。在梯度洗脫期間，當有機溶劑量達到針對每一蛋白質的特定濃度時，蛋白質就會從疏水界面上解吸，繼續順著柱向下，從而從柱中洗脫。圖14. 當有機改性劑的濃度達到特定值時，蛋白質從疏水界面洗脫。乙腈。在多肽的反相色譜分離時最常
反相高效液相色譜1
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件實驗材料蛋白質標樣試劑、試劑盒乙睛（HPLC級）去離子水（HPLC級）三氟乙酸（TFA)儀器、耗材HPLC 色譜系統反相柱實驗步驟1.進行空白或對照層析譜分析（即在步驟①中不加樣）。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相色譜
實驗材料 蛋白質標樣試劑、試劑盒 乙睛（HPLC級）去離子水（HPLC級） 三氟乙酸（TFA)儀器、耗材 HPLC 色譜系統 反相柱實驗步驟 1.進行空白或對照層析譜分析（即在步驟①中不加樣）。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系統評估的標準色譜條件。（1）線性梯
肽質量指紋圖譜—MALDITOF－法鑒定蛋白質實驗（一）
實驗材料?測序級豬胰蛋白酶試劑、試劑盒?碳酸氫銨碳酸氫銨緩沖液乙腈 碳酸氫銨緩沖液消化緩沖液儀器、耗材?真空離心機烤箱實驗步驟 許多凝膠染色方法適用于后續的 MALDI-TOF 肽質量指紋圖譜（PMF ) 分析。在第 14 章已經比較討論了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 膠內消化凝膠消化方法改編
反相高效液相色譜4
方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗實驗材料用于分析的肽或蛋白試劑、試劑盒丙酮乙腈（HPLC級）2 -丙醇乙醇硝酸鈉硫酸鈉硫脲三氟乙酸儀器、耗材分析型 HPLC 裝置離心機錐形瓶玻璃容器Hamilton 玻璃注射器氮氣冷凍干燥機流動相過濾裝置氦氣制備型 HPLC 裝置實驗步驟一、
蛋白質氨基端及羧基端序列分析實驗
方案1 兩相柱測序儀的樣品上樣實驗實驗材料樣品溶液試劑、試劑盒甲醇（HPLC級）三氟乙酸（TFA）儀器、耗材雙向測序柱（Agilent）氮氣供應設備聚丙烯試管樣品加樣器上樣漏斗實驗步驟一、浸潤層析柱1.將準備好的兩相柱的親水段（凸向接頭）移開，放在一邊。2.將柱的疏水段（凹向接頭）和上樣漏斗裝配在一
制備色譜技術的簡答（二）
1 問: 我想購買waters600用于分析和制備，對于其配備有什么好的建議。答： ?可以配一個PDA，另外加一個示差折光410，另外買幾根制備柱就可以了。 waters600的流速最大為20mL/min，一般可以配20mm ID的制備柱，一次分離10-100mg的樣品，如果樣品量更大，可以通過
空間中心等提出由X射線成像圖反演磁層頂位形的新方法
太陽風中的高價重離子和地球大氣逃逸出的中性成分碰撞，發生電荷交換（solar wind charge exchange, SWCX），從而輻射X射線。以此為原理對地球磁層進行X射線成像探測，將有望首次在大尺度上揭示太陽風-磁層相互作用的基本模式。在成像探測過程中，視線方向的X射線信號將被疊加，損
賽默飛世爾科技于ASMS－2011發布最新LC/MS混合溶劑
丹佛(2011年6月5日) - 世界領先的科學服務商賽默飛世爾科技，今天宣布將在6月5-9號位于丹佛舉行的第59屆全美質譜大會(ASMS)上展示隨時取用的OPTIMA? LC/MS 混合溶劑，展示地點為Thermo Scientific 展臺110號或 Hyatt Regency酒店Ce
反相高效液相色譜5
方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合物進行脫鹽實驗實驗材料蛋白質或多肽樣品試劑、試劑盒乙腈（HPLC級）2 -丙醇硝酸鈉硫脲三氟乙酸儀器、耗材分析型 HPLC 裝置色譜柱洗脫液瓶Hamilton 玻璃注射器氮氣量筒微量離心機流動相過濾裝置實驗步驟一、流動相的配制1.配制緩沖液 A(弱流
蛋白質氨基端及羧基端序列分析實驗
方案1 兩相柱測序儀的樣品上樣實驗 方案2 將蛋白質從凝膠電轉移至 PVDF 膜實驗 方案3 檢測 PVDF 膜上的蛋白質實驗 方案4 濃縮聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白質點實驗 方案5 磷酸化多肽的固相微量測序實驗 方案6 羧基端序列分
反相高效液相色譜
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件 方案2 填充 RP-HPLC 毛細管微柱 方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗 方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗 方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合
氨基去保護后，怎么除去三氟乙酸
謝謝bigcity(站內聯系TA)NH的TFA鹽，據我的經驗溶解性在CH2Cl2 中號是不錯的，可以先將樣品溶于CH2Cl2 中加容2當量NaHCO3，攪拌過濾即可以。不過不知道你的化合物是不是分子量太大了， 脫完鹽后溶不容于CH2Cl2，你可以少量試試。tlmouyg(站內聯系TA)我最還是就是試