關鍵詞：
超高效液相色譜 奶粉 牛奶 Fructose( 果糖 )Sorbose （山梨糖 )
Glucose( 葡萄糖 )Sucro se( 蔗糖 )Malto se( 麥芽糖 )Lacto se( 乳糖 )
Maltotriose( 麥芽三糖 ) Maltotetraose( 麥芽四糖 )
實驗方法
材料、試劑和儀器
乙腈為色譜純，三乙胺為優級純，實驗用水為超純水
(18MΩ,TOC3ppb) ， ACQUITY UPLC 超高效液相色譜系統，Acquity ?
ELSD 檢測器 ,(FILTER MIXER (425μl,P/N 205000403), 可不用 ) 。
色譜條件
液相系統：Waters ACQUITY UPLC ?
配 ACQUITY ELSD 蒸發光散射檢測器
色譜柱： AACQUITY UPLC BEH Amide 2.1mm x 100mm ，1.7 μm, P/N:1860 04801
柱溫：35?C
分析時間：18min
進樣量： 5ul( 樣品進樣 2ul)
流動相： A: 水 B:0.2%TEA 乙腈溶液 ; 梯度 洗脫
弱洗溶劑： 乙腈 / 水 =90 /10 ， 8 00μl
強洗溶劑： 乙腈 / 水 =10/9 0 ， 500 μl
進樣方式： 不充滿定量環（使用針溢出）
ELSD 條件：
增益： 5 00
數據率： 10pp s
噴霧器模式： 冷卻
漂移管溫度： 55?C
氣體壓力： 30 psi
實驗室試驗溫度： 20? C
實驗室試驗濕度： 45%
工作電源： 220V 穩定電源
梯度方法見下表：
數據處理系統
Empower 2
前處理方法
稱取 2. 0 g 奶粉樣品或 5ml 液態奶樣品，加入20mL( 對于液態奶添加 15ml)1/1 的乙腈水溶液溶解，手搖震蕩混勻，然后渦旋混勻 2 分鐘，室溫下 8000 r/min 離心 15 分鐘，取上清液過0 .2μm濾膜；對于某些樣品由于糖含量很高，所以過濾后的樣品可能需要用乙腈 / 水 =7 0/3 0 的溶液稀釋一定倍數后，進樣檢測。
結果與討論
標準配制
八種糖標準分別稱取 10 mg ，用 1/1 的乙腈水定容至 1ml ，然后用乙腈 / 水 =70/3 0 的溶液稀釋配制各個濃度的標準品，進行實驗。
八種糖 UPLC 分離檢測色譜圖及數據
圖 1. 八種糖 UPLC 分離檢測色譜圖
圖 1 是八種糖 50ppm 混合標準品用 UPLC(ACQUITY UPLC BEH Amide色譜柱) 分離， E LSD 檢測的色譜圖，按照保留時間順序分別是： Fructo se( 果糖 ) 、 Sorbose( 山梨糖 ) 、 Glucose( 葡萄糖 ) 、 Sucrose( 蔗糖 ) 、 Malto se( 麥芽糖 ) 、 Lacto se( 乳糖 ) 、 Maltotriose( 麥芽三糖 ) 、 Maltotetraose( 麥芽四糖 ) ；包括 5 種單糖和 3 種多糖。有關數據見下表。
表 2. 八種糖 標準品分離分析數據
其中較難分離的 Fructose( 果糖 ) 和 So rbose( 山梨糖 ) 、 Maltose( 麥芽糖 ) 和 Lacto se( 乳糖 ) 均分別達到 1.6 、 1.5 的分離度。