問:1.兩種細胞,對照和過表達細胞,細胞增殖實驗,隨著時間的延長兩種細胞差值越來越大,我是平均十分鐘測一次,感覺效率很低,這有解決方法嗎?
2.為什么過表達之后細胞與NC沒明顯區別呢?過表達結果已經經過驗證了,別的文獻也報道過有結果
答:1.CCK8的吸光度的值與細胞數密切相關,如果檢測增殖的話,建議選取加入CCK8后相同時間檢測(我的實驗我選取的是2h),理論上CCK8的值在1-2是比較準的,因為較早的時間點細胞數比較少,值比較低也沒關系,因為要考慮之后的多個時間點盡量把值保持在1-2之間即可,所以你根據你的細胞數選取合適的時間。
2你的過表達和NC沒有差異,因為是兩株細胞,所以在鋪板的時候沒法保證細胞數量一致,因此建議細胞計數的時候多數幾次,盡量保證細胞數一致。如果細胞數確定一致,并且重復多次都無差異,那只能說對增殖沒有影響。