• <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
  • <table id="ommkm"><option id="ommkm"></option></table>
  • <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
    <rt id="ommkm"><option id="ommkm"></option></rt>
  • <noscript id="ommkm"></noscript>
  • 發布時間:2022-06-07 16:30 原文鏈接: pcr反應的一般程序與注意事項

    標準的PCR反應體系:10×擴增緩沖液
    10ul
    4種dNTP混合物
    各200umol/L
    引物
    各10~100pmol
    模板DNA
    0.2ug
    Taq
    DNA聚合酶
    2.5u
    Mg2+
    1.5mmol/L
    加雙或三蒸水至
    100ul
    PCR反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR
    產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度.理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增.設計引物應遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右.②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段.③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶.ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列.④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶.⑤引物3’端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗.⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處.⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性

    相關文章

    羅氏診斷首款國產PCR一體機獲批

    1月5日,國家藥監局發布醫療器械批準證明文件,其中羅氏診斷產品(蘇州)有限公司最新獲批一款全自動核酸提取及熒光PCR檢測系統(國械注準20253222730)。這是目前羅氏診斷獲批的首個國產PCR一體......

    4500萬+預算,海關總署75臺套儀器設備重新招標

    近日,海關總署物資裝備采購中心發布多則公告,分別就“海關總署2025年數字化攝影X射線系統采購項目(重新招標)”“海關總署2025年PCR儀采購項目(重新招標)”“海關總署2025年彩色多普勒超聲診斷......

    閃量科技全自動PCR分析系統列入國家重點研發計劃的醫療器械

    醫療器械優先審批申請審核結果公示(2025年第14號)依據原國家食品藥品監督管理總局《醫療器械優先審批程序》(總局公告2016年168號),對申請優先審批的醫療器械注冊申請進行審核,現將符合優先審批情......

    超6900萬元!海關總署最新一批液質、氣相、PCR等儀器中標出爐

    近日,海關總署陸續公布了一批分析儀器的采購項目中標結果,涵蓋氣相色譜儀、超高效液相色譜-三重四極桿質譜儀、波長色散X射線熒光光譜、PCR儀蛋白質測定儀、基因測序儀等多個領域,總中標金額高達6900余萬......

    伯樂公司通過戰略收購與平臺推出擴展四款數字PCR產品系列

    全球生命科學研究和臨床診斷產品領域的領導者伯樂實驗室有限公司(紐約證券交易所代碼:BIO和BIO.B)近日宣布推出四款新的微滴式數字PCR(ddPCR?)平臺。新推出的儀器包括伯樂公司的QXConti......

    醫療器械優先審批申請審核結果公示(2025年第6號)

    國家藥品監督管理局醫療器械技術審評中心發布醫療器械優先審批申請審核結果公示(2025年第6號),同意了蘇州淦江生物技術有限公司申請的運動神經元存活基因1(SMN1)檢測試劑盒(PCR-熒光探針熔解曲線......

    3280萬元華中農業大學大批儀器采購意向涉PCR、蛋白純化等

    近日,華中農業大學發布多個實驗室儀器設備政府采購意向,采購的產品包括:超高分辨多色快速成像系統、熒光定量PCR儀、顯微鏡、蛋白純化系統、分析天平、電泳儀、搖床、細胞破碎儀、核酸轉染系統、純水系統等,采......

    伯樂領投Geneoscopy公司完成1.05億美元的C輪融資

    Geneoscopy公司周三宣布已完成1.05億美元的C輪融資。此輪融資由伯樂實驗室領投,兩家公司在一份聯合聲明中表示,這筆資金將用于支持Geneoscopy公司無創結直腸癌篩查檢測的推出。參與此次融......

    9.5個億!伯樂收購PCR公司

    波蘭生命科學公司ScopeFluidics近日表示,在收到交易的最后一筆款項后,該公司最近敲定了以1.3億美元(約合9.5億元人民幣)的價格將其子公司CuriosityDiagnostics出售給Bi......

    北京市聚合酶鏈反應(PCR)檢驗實驗室檢查指南(2024版)

    京藥監發〔2024〕261號各區市場監管局,房山區燕山市場監管分局,市市場監管局機場分局,經開區商務金融局,市藥監局各分局,各相關事業單位:為深入貫徹落實醫療器械生產監管相關法規要求,進一步規范北京市......

  • <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
  • <table id="ommkm"><option id="ommkm"></option></table>
  • <noscript id="ommkm"><source id="ommkm"></source></noscript>
    <rt id="ommkm"><option id="ommkm"></option></rt>
  • <noscript id="ommkm"></noscript>
  • 国产精品单位女同事在线