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  • 免疫熒光技術的實驗方法及其分類

    一、免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮,檢測產物發出的熒光,熒光強度與Mb濃度呈正比,可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示(△Mb)表示。該法重復性好,線性范圍寬,具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例,首先將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體。除去未結合抗體,然后加受檢標本,使其中的蛋白抗原與固相抗體形成抗原抗體復合物。洗滌除去未結合物,接著加入熒光標記的抗體,使之與抗原特異性結合,形成抗體—抗原—抗體復合物。最后根據熒光強度,即可對蛋白抗原進行定量。傳統的熒光免疫法受本底熒光的干擾較大,時間分辨熒光免疫測定法是以具有特長壽命的稀土金屬如銪,作為標記物,加入正常液后激發測定,能有效去除短壽命本底熒光的干擾。2.放射免疫法放射免疫法是以過量的未標記抗原與放射性物質標記的抗原,競爭性地與抗體結合,形成有放射性的抗原—抗體復合物與無放射性的抗原—抗......閱讀全文

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    免疫熒光技術技術分類

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    免疫熒光技術

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