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  • 【實驗技巧】麗春紅染色

    麗春紅(Ponceau S)染色是 WB 實驗中的一個重要環節,今天就來給大家詳解麗春紅染色的作用和操作方法。麗春紅染色作用可用于 PVDF 膜,硝酸纖維素膜和和醋酸纖維素膜上的蛋白的檢測。麗春紅染色原理麗春紅帶負電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結合,同時麗春紅也可以與蛋白的非極性區相結合,從而形成紅色的條帶。麗春紅特性麗春紅對蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸餾水,PBS 或其它適當溶液洗去。為什么要用麗春紅染色?通過麗春紅染色可驗證轉膜效率,及每孔上樣蛋白總量是否均等,可以幫助后續實驗進行內參調整或問題分析。特別說明:麗春紅染色液不適用于尼龍膜上的蛋白檢測。操作方法1. 將轉印膜浸沒在麗春紅染色液中,用搖床孵育轉印膜 1-30 分鐘。2. 取出轉印膜,用去離子水沖洗膜直到背景干凈(通常不超過 5 分鐘),條帶清晰,記錄結果。染液可以繼續用去離子水洗滌完全去除麗春紅,進行后續的 WB 檢測。......閱讀全文

    糖類染色實驗——糖原染色

    實驗方法原理糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙重蒸餾水

    人類染色體姊妹染色單體差別染色

    ?????姊妹染色單體區分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期發展起來的染色體處理技術。Latt(1973)在培養的細胞中加入5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU),當用Hoechst33258 熒光染料染色時,發現了姊妹染色單體的色差反映和它們

    姐妹染色單體分化染色實驗

    實驗方法原理 細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體

    姐妹染色單體分化染色方法

    姐妹染色單體差別染色可使中期染色體顯示深淺不同的兩條單體,能借以觀察姐妹染色單體互換(SCE)現象。SCE是兩條染色單體在DNA合成中核苷酸序列發生互換而表現出來一種現象。即是細胞分裂是DNA同源重組的結果。SCE既是一種無害的變化(有生理波動),也可受射線、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一

    姐妹染色單體分化染色實驗

    實驗概要本文介紹了姐妹染色單體分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理姐妹染色單體分化染色法(Sister ?chromatid ?differentiation,SCD)是20世紀70年代中期發展起來的染色體處

    革蘭氏染色液染色法

    ??1.葡萄球菌和大腸桿菌混合菌液。????2.結晶紫染色液。????3.革蘭氏碘液。????4.95%酒精。????5.番紅染液。????6.載玻片。方???法?????一、涂片標本的制備(見實驗一)????二、革蘭氏染色法?????1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加結晶紫染液,染色1分鐘,水洗

    間接染色步驟(細胞表面染色)

    實驗概要間接標記需要兩個孵育步驟,先與一抗再與合適的第二抗體孵育,二抗(不是一抗)結合了熒光染料(FITC、PE、Cy5 等)。請注意這是一個普遍的程序,您可以根據自己的使用情況進行調整。實驗步驟1.?收集并洗滌細胞,然后確定細胞總數。細胞通常在聚苯乙烯的圓底 12 x 75 mm2 Falcon

    姐妹染色單體分化染色實驗

    實驗方法原理細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體D

    糖類染色實驗——黏液物質染色

    實驗方法原理在人體和動物體中能夠分泌黏液物質,依其物質中含有的酸基不同,所以分為中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被稱為中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿爾辛藍高碘酸 Shiff 反應(ABPAS)染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒阿爾辛藍 8 GS冰醋酸蒸餾水麝香

    染色質染色體和染色單體的區別

      (1)、染色質和染色體的主要成分都是DNA和蛋白質,它們之間的不同,不過是同一物質在細胞分裂間期和分裂期的不同形態表現而已。  染色質出現于間期,呈絲狀。它們在核內的螺旋程度不一,螺旋緊密的部分,染色較深,有的螺旋松疏染色較淺,染色質在光鏡下呈現顆粒狀,不均勻地分布于細胞核中。細胞分裂時染色質細

    血細胞化學染色的染色法—鐵染色的介紹

      (1)血細胞化學染色的染色法—鐵染色的原理:人體內有一定量的以鐵蛋白和含鐵血黃素形式貯存的鐵元素,這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應,生成藍色的亞鐵氰化鐵沉淀(普魯士藍),定位于含鐵的部位。  (2)血細胞化學染色的染色法—鐵染色的操作方法:將染色液滴加在骨髓小粒豐富的骨髓涂片上,室溫20~30

    血細胞化學染色的染色方法—-糖原染色(PAS)的介紹

      (1)血細胞化學染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。  (2)血細胞化學染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液

    鞭毛染色配制及染色方法實驗

    實驗步驟改良Ryui法一、實驗試劑:A液:5%石炭酸:???? 10ml鞣酸:??????????? 2g飽和硫酸鋁鉀液:10mlB液:結晶紫酒精飽和液應用液:A液10份,B液1份,混合,室溫存放。二、染色方法:1. 玻片的處理:要求用新的載玻片,用前須在95%酒精中浸泡24小時以上,用時從酒精中取

    姐妹染色單體分化染色法

    1. 實驗原理 姐妹染色單體分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世紀70年代中期發展起來的染色體處理技術。1973年Latt在培養的細胞中加入5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-Bromode Oxyurdine,BrdU),用Hoechst 3

    細菌的簡單染色和革蘭氏染色

    (一)實驗目的:學習細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法。(二)實驗原理:用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷,能和帶負電荷的物質結合。因細菌蛋白質等電點較低,當它生長于中性、堿性或弱酸性的溶液中時常帶負電荷,所以通常采用堿性染料(如美藍、結晶紫、堿性復紅或孔

    抗酸染色配置以及染色方法實驗

    實驗方法原理抗酸染色直接用于痰標本時,可以適當曾加標本涂片的厚度,以提高檢出率。染厚涂片時,須掌握復染色時間,如果背景過深,影響鏡檢。實驗步驟堿性復紅染色法:(萋納Ziehl-Neelsen法)一、實驗試劑:1. 萋納石炭酸復紅溶液:堿性復紅乙醇飽和溶液:10ml5%石炭酸溶液:?????? 90m

    脂質染色實驗_蘇丹-III-染色

    實驗材料冰凍切片試劑、試劑盒蘇丹 III乙醇蒸餾水自來水甘油明膠鹽酸乙醇Harris 蘇木精儀器、耗材彎鉤玻璃棒載玻片實驗步驟蘇丹 III 染色液:蘇丹 III 2.5 g,70% 乙醇 500 ml,充分溶解后,室溫下形成飽和溶液,可存放較長時間。1. 冰凍組織切片厚 10~20 μm 左右,采用

    電子染色的染色特點介紹

    電子染色(electron stain)是利用某些重金屬鹽(鈾、鉛等)能與細胞的某些結構和成分結合,以提高電子密度來增強結構的反差。

    細菌的簡單染色和革蘭氏染色

    (一)實驗目的:學習細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法。 (二)實驗原理:用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷,能和帶負電荷的物質結合。因細菌蛋白質等電點較低,當它生長于中性、堿性或弱酸性的溶液中時常帶負電荷,所以通常采用堿性染料(如美藍、結晶紫、堿性復紅或

    鞭毛染色配制及染色方法實驗

    實驗步驟 改良Ryui法一、實驗試劑:A液:5%石炭酸: ? ? 10ml鞣酸: ? ? ? ? ? ?2g飽和硫酸鋁鉀液:10mlB液:結晶紫酒精飽和液應用液:A液10份,B液1份,混合,室溫存放。二、染色方法:1. 玻片的處理:要求用新的載玻片,用前須在95%酒精中浸泡24小時以上,用時從酒精中

    革蘭氏染色配制及染色方法實驗

    實驗方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于標本涂片或菌落涂片。染色結果將細菌分為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性兩類。實驗步驟一、實驗試劑:1. 結晶紫溶液:A液:結晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸銨:0.8g,蒸餾水:80ml。需在用前24小時將A液. B液混合,過濾后裝入試劑瓶內備用。2.

    抗酸染色配置以及染色方法實驗

    實驗方法原理抗酸染色直接用于痰標本時,可以適當曾加標本涂片的厚度,以提高檢出率。染厚涂片時,須掌握復染色時間,如果背景過深,影響鏡檢。實驗步驟堿性復紅染色法:(萋納Ziehl-Neelsen法)一、實驗試劑:1. 萋納石炭酸復紅溶液:堿性復紅乙醇飽和溶液:10ml5%石炭酸溶液:?????? 90m

    瑞氏染色法:染色原理

     既有物理的吸附作用,又有化學的親和作用。各種細胞成分化學性質不同,對各種染料的親和力也不一樣。如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質;細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞胞質為酸性,與堿性染料美藍或天青結合,染紫藍色或藍色,稱為嗜堿性物質;中性顆粒呈等電狀態

    關于芽孢染色的染色方法介紹

      (1)芽孢染色— 將培養24小時左右的枯草芽孢桿菌或其他芽孢桿菌,作涂片、干燥、固定。  (2)芽孢染色—?滴加3—5滴孔雀綠染液于已固定的涂片上。  (3)芽孢染色—?用木夾夾住載玻片在火焰上加熱,使染液冒蒸汽但勿沸騰,切忌使染液蒸干,必要時可添加少許染液。加熱時間從染液冒蒸汽時開始計算約4—

    革蘭氏染色配制及染色方法實驗

    實驗方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于標本涂片或菌落涂片。染色結果將細菌分為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性兩類。實驗步驟一、實驗試劑:1. 結晶紫溶液:A液:結晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸銨:0.8g,蒸餾水:80ml。需在用前24小時將A液. B液混合,過濾后裝入試劑瓶內備用。2.

    瑞氏染色法染色原理

    瑞氏染色法染色原理:? ? 為了觀察細胞內部結構,識別各種細胞及其異常變化,血涂片必須進行染色。瑞氏染色法是血細胞分析最經典和最常用的染色法。瑞氏染料:? ? 是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍組成的復合染料。染色原理: ? 是染料透入被染物并存留其內部的一種過程,此過程既有物理的吸附作用,又有化學的

    革蘭氏染色法的染色原理

    革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-)兩大類,是細菌學上最常用的鑒別染色法。該染色法之所以能將細菌分為G+菌和G-菌,是因為一般認為革蘭氏染色是基于細菌細胞壁特殊化學組分進行染色的。?通過初染和媒染后,細胞內形成了不溶于水的結晶紫一碘大分子復合物。革蘭氏陽性細菌由

    細菌的簡單染色和革蘭氏染色

    (一)實驗目的:學習細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法。(二)實驗原理:用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷,能和帶負電荷的物質結合。因細菌蛋白質等電點較低,當它生長于中性、堿性或弱酸性的溶液中時常帶負電荷,所以通常采用堿性染料(如美藍、結晶紫、堿性復紅或孔

    洋紅染色劑的染色配方

    通常的染色配方為:(1)醋酸洋紅配方:冰醋酸1體積、蒸餾水1體積、洋紅飽和量。配法:冰醋酸與蒸餾水混合煮沸,加入洋紅再煮20分鐘。(2)明礬洋紅配方:洋紅1g,銨明礬或鉀明礬10g,蒸餾水100mL。配法:先將明礬溶于蒸餾水,再加入洋紅煮沸,冷卻后加入少量防腐劑(水楊酸鈉、石炭酸等)。(3)硼砂洋紅

    染色技術

    由于微生物細胞含有大量水分(一般在80-90%以上),對光線的吸收和反射與水溶液的差別不大,與周圍背景沒有明顯的明暗差。所以,除了觀察活體微生物細胞的運動性和直接計算菌數外,絕大多數情況下都必須經過染色后,才能在顯微鏡下進行觀察。但是,任何一項技術都不是完美無缺的。染色后的微生物標本是死的,在染色過

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