細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（一）
兔膀胱平滑肌細胞培養可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞；（2）進行細胞學鑒定研究；（3）用于細胞學其他研究。實驗方法酶分離法 實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況，同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析，并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒定分析。最后根據細胞計數繪制細胞生長曲線和增殖曲線。 實驗材料雄性新西蘭白兔 試劑、試劑盒DMEM Ⅱ型膠原酶 α-平滑肌肌動蛋白抗體 胎牛血清 胰蛋白酶 D-Hanks’液 儀器、耗材飯盒 眼科直剪 眼科彎剪 眼科直鑷 眼科彎鑷 玻璃培養皿 廣口瓶 燒杯 錐形瓶 離心管 磁力攪拌器 攪拌子 目尼龍篩網 針式濾器 實驗步驟一、實驗方法 1. 膀胱平滑肌細胞酶法分離（1）肌注鹽酸氯胺酮200 mg 及氟哌利......閱讀全文
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（一）
兔膀胱平滑肌細胞培養可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞；（2）進行細胞學鑒定研究；（3）用于細胞學其他研究。實驗方法酶分離法 實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（三）
?收起? 注意事項1. 應嚴格無菌操作。2. 仔細徹底剝除膀胱黏膜、黏膜下及漿膜層，是確保獲的大量高質單個膀胱平滑肌細胞的基礎。3. 膀胱平滑肌組織應盡量減碎以確保充分消化。4. 嚴格控制膠原酶和胰蛋白酶的濃度和消化時間，見消化液混濁、組織塊呈絮狀，或在倒置顯微鏡下見消化液中有較多單個細胞或細胞小
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（二）
二、結果 兩只兔所有標本均獲成功。倒置顯微鏡觀察平滑肌細胞24 小時均可見膀胱平滑肌細胞貼壁生長，正常兔 7 天左右、而梗阻兔則需10~12 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。均傳代順利，傳代后約正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。本組中均傳至第8 代，經第8
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離
兔膀胱平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況，同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析，并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗——酶分離法
兔膀胱平滑肌細胞培養可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞；（2）進行細胞學鑒定研究；（3）用于細胞學其他研究。實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長
細胞技術專題：人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
人臍動脈平滑肌細胞培養可以：（1）獲得人臍動脈平滑肌細胞；（2）作為重大動脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法消化法 貼塊法 實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。 實
細胞技術專題：小鼠腹腔巨噬細胞培養實驗
小鼠腹腔巨噬細胞培可以：（1）吞噬與清除異物；（2）分泌生物活性物質；（3）對仿生全降解材料，降解后的無機產物與生命過程中有機物的合成作用。實驗方法細胞培養技術實驗方法原理取小鼠腹腔巨噬細胞與乳膠顆粒在不同培養條件下混合后定量加入24孔板，37 ℃，5% CO2?培養箱中孵育后，熒光顯微鏡下計數吞噬
細胞技術專題：大鼠肝星狀細胞培養實驗
實驗方法細胞培養技術 實驗方法原理選用Wistar大鼠經消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC，通過觀察其自發熒光及其顯著特征性結構的脂肪染色、細胞免疫化學染色等方法鑒定。 實驗材料雄性 SD 大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
正常大兔主動脈平滑肌細胞培養
實驗材料：1.?正常大兔主動脈2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.23.?消化液：0.125%胰蛋白酶，0.1%膠原酶Ⅰ4.?細胞培養瓶（T25）5.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷6.?網篩（100目）7.?離心管（15m
細胞技術專題：大鼠視神經少突膠質細胞培養實驗（一）
標簽： 大鼠 視神經 少突 膠質 大鼠視神經少突膠質細胞培養可以：（1）獲得大鼠視神經少突膠質細胞；（2）用于視神經損傷修復研究；（3）用于少突膠質細胞相關課題研究。實驗方法牛血清培養法 實驗方法原理采用視神經，DMEM/F12條件培養基培養，觀察細胞形態及生長，并進行免疫組織化學鑒定。 實驗材料W
細胞技術專題：大鼠星型膠質細胞培養實驗
大鼠星型膠質細胞培養可以：（1）用于神經系統發育、分化及再生等基礎研究；（2）腦缺血預處理上調神經保護蛋白的機制研究；（3）腦損傷和腦疼痛的研究；（4）新蛋白的功能研究。 ?實驗方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 實驗材料大鼠胚胎 試劑、試劑盒L-15培養基 膠原酶 Dnase D-MEM-B
細胞技術專題：大鼠視神經少突膠質細胞培養實驗（二）
2. 免疫組織化學染色結果培養的視神經少突膠質細胞的免疫組織化學染色 GC 蛋白陽性，未加一抗的呈陰性。染色結果顯示成熟的少突膠質細胞突起豐富，互相形成蜘蛛網狀(圖 3)。蘇木素復染，異質細胞較少，90%以上為陽性細胞(圖 4)。? Figure 1 Cells migrated from opti
細胞技術專題：大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗
大鼠大腦皮層神經元細胞培養可以：（1）獲得大鼠大腦皮層神經元細胞；（2）用于神經元細胞定向分化研究；（3）用于神經元細胞凋亡研究。實驗方法機械性劃割培養 酶消化法 實驗方法原理SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d，微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元，依劃割程度不同分為輕、中、重
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
細胞技術專題：細胞傳代實驗
根據細胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養，并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
細胞技術專題：原代胚胎成纖維細胞培養
實驗器材手術小直剪刀三把、眼科直鑷子三把、眼科彎鑷子兩把、玻璃平 皿三套、200目尼龍濾網、50ML、15ML離心管和手術刀片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。實驗試劑無Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纖維細胞（MEF）生長培養基：高糖DMEM
平滑肌細胞培養方法
貼壁法原代培養1.1 細胞培養1.1.1 培養液配制 DMEM（美國Gibco公司），Hepes（15mmol/L），青霉素（100u/ml），鏈霉素（100mg/ml），優質胎牛血清（原代培養濃度20%，傳代培養濃度10%，美國Hyclone）。1.1.2 培養器皿 25cm2塑料培養瓶（Cost
細胞技術專題：細胞生長曲線實驗
細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法，是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后，經過短暫的懸浮然后貼壁，隨后度過長短不同的潛伏期，即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化，典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期，斜率較大的指數生長期，呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——消化法
人臍動脈平滑肌細胞培養可以：（1）獲得人臍動脈平滑肌細胞；（2）作為重大動脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原
平滑肌細胞培養方法3
2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來（見圖1），但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出，離組織塊較遠的區域也可以看到細胞，此為平滑肌細胞的漂移性生長特性（見圖2），細胞形態多樣，大小不一，多為長梭形
平滑肌細胞培養方法4
?動脈平滑肌細胞培養的幾個問題組織塊大小邊緣密度翻面時間觀察時間對原代細胞萌發的影響對于貼塊法的原代培養來源，由于細胞并非直接獲得，而是從組織塊邊緣長出，其中有一“突破過程”，且細胞萌發后尚需一定的細胞密度才能使其存活、增殖，故組織塊大小、邊緣、密度均影響細胞萌出與否及細胞存活、增殖。公認的方法是將
平滑肌細胞培養方法2
1 材料與方法1.1 材料 9~12d新生健康清潔級KM小鼠，雌雄不限，購自重慶醫科大學實驗動物中心。RPMI-1640干粉培養基，D-Hanks粉，標準胎牛血清，胰蛋白酶粉（1∶250）均購自Hy-Clone公司；青霉素鈉、硫酸鏈霉素購自華北制藥廠；鼠抗兔平滑肌α肌動蛋白單克隆抗體，購自Zymed
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
細胞傳代實驗——細胞培養技術
細胞傳代實驗可用于：（1）醫學研究；（2）提供細胞種。（3）進行細胞生物學研究。實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——貼塊法
實驗方法原理運用貼塊法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液胰蛋白酶膠原酶彈性蛋白酶DMEM儀器、耗材眼科剪滴管離心機培養皿CO2培養箱實驗步驟一、實驗步驟1. ?要用胎牛血清。開始用的是小牛血清，所以總是不
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM