小鼠腦出血模型的建立
實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 戊巴比妥鈉儀器、耗材 鉆孔器注射器含抗凝血劑的試管鼠板縫合方針和線實驗步驟 1．固定小鼠 a．用繩子將已麻醉的小鼠俯臥（背朝上）固定在鼠板上，繩子用活結，這樣不易打滑。固定時要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線上。 b．用棉花將小鼠的頭微微墊高，這樣方便切開皮膚。 2．鉆孔 a．將小鼠的頭部順著人字縫皮膚切開大約3~5cm，露出小鼠的頭骨。 b．找到小鼠的人字縫在其右邊1~2mm處做好鉆孔的標記。 c．用鉆孔器在記號處垂直鉆孔，深度不宜太大。（防止鉆入腦組織，在有落空感時停止） d．止血。 3．注射a.將小鼠的尾部間斷一截，用手指將血液擠出，并用裝有抗凝血劑的試管將血液收集，小鼠血液量大致為2ml。 b．將針管對準小鼠頭骨上的小孔。將針管插入小鼠顱腔內，插入深度大約為1.5cm。 c．推動針管的......閱讀全文
小鼠腦出血模型的建立
實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 戊巴比妥鈉儀器、耗材 鉆孔器注射器含抗凝血劑的試管鼠板縫合方針和線實驗步驟 1．固定小鼠?a．用繩子將已麻醉的小鼠俯臥（背朝上）固定在鼠板上，繩子用活結，這樣不易打滑。固定時要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線上。?b．用棉花將小鼠的頭微微墊高，這樣方便切開皮膚。
小鼠腦出血模型的建立
實驗材料小鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉儀器、耗材鉆孔器注射器含抗凝血劑的試管鼠板縫合方針和線實驗步驟1．固定小鼠?a．用繩子將已麻醉的小鼠俯臥（背朝上）固定在鼠板上，繩子用活結，這樣不易打滑。固定時要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線上。?b．用棉花將小鼠的頭微微墊高，這樣方便切開皮膚。?2．鉆
轉基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1）? 點燃酒精燈，調節火焰到最佳。捏持玻璃毛細吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋轉過火。2）? 當吸管開始變軟，快速撤離火焰，向外急劇扯拉使吸管變長，形成口徑大約200?l的吸管。注意制備過程中離開火焰的時間以及扯拉的力度，盡量保證制備吸管的一致性。3）? 為吸管評分，輕柔地折斷吸管，辨別
轉基因小鼠模型的建立(SOP)1
名稱：轉基因小鼠模型的建立(SOP)關鍵詞：轉基因小鼠目的：在動物體研究轉化基因原理：轉基因動物是指染色體基因組中整合有外源基因并能遺傳給后代的一類動物。整合到動物染色體基因組的外源基因稱為轉基因。轉基因技術則是指制備轉基因動物所需的一套技術，它涉及外源基因的構建、載體和受體的篩選、基因導人技術、供
轉基因小鼠模型的建立(SOP)4
（6）? 為保暖包裹小鼠于紗布中或將其放置于熱墊內使其蘇醒，處于麻醉狀態下的小鼠應該嚴格監護直到其完全蘇醒。手術后小鼠飼養2周后確定手術是否成功。（7） 實驗性飼養：將1-2只母鼠與輸精管切除小鼠合籠飼養，次晨進行陰道栓檢查。有陰道栓的母鼠，用磷酸緩沖液處理后24小時，其輸卵管潮紅。卵細胞應該處于單
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
10）? 移卵操作完成后，撤回移卵管，去除器械，按原本位置將各器官重置于腹腔內。10）縫合切口，用小夾夾持皮膚。常用自動小夾代替縫線，這樣可以避免小鼠啃嘶縫線，切口裂開。11）若進行雙側手術，則于另一側子宮角重復上述操作。12）手術完成后，安置小鼠于清潔的籠中。麻醉狀態下，小型哺乳動物無法有效維持機
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
4）? 如果未見DNA溶液流，則輕輕摩擦持樣器鈍緣，漸漸的打開注射器針頭。針頭重新進入油內確定DNA溶液流的存在。5）? 移動持卵管回到受精卵下部。通過微分驅動水壓控制系統使持卵管內產生溫和的負壓，并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必須確保受精卵基底部與凹玻片基底部輕輕接觸。注意不宜吸得過緊，否則會使
轉基因小鼠模型的建立(SOP)8
（1）? RNA的分離：根據實驗者的需要從轉基因小鼠組織或細胞中提取總RNA或mRNA。分離總RNA比較簡單，且適合做基因做基因轉錄分析。實驗操作參見第一章的第四節。（2）? Northern 印跡分析：該技術用于定性檢測轉基因動物組織或細胞中轉基因轉錄的相對水平。其實驗操作參見第一章的第九節。（3
轉基因小鼠模型的建立(SOP)3
（2）受體母鼠的準備輸卵管轉移的受體鼠應該為4-6周齡大小，體重在20-25克左右，嚴禁用低體重以及超重母鼠，若體重較低，其體能不足以維持妊娠，可能導致受精卵的重新吸收；若體重較重，麻醉劑被吸收入脂肪組織，降低麻醉效果，可能使手術困難，而且脂肪組織的存在意味著靜脈的存在，所以手術時切掉脂肪組織可能導
轉基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之處]（1）外源基因隨機整合；（2）個別原核不清晰，需進行特殊處理；（3）需大型精密儀器，費用昂貴；（4）操作周期相對較長。（二）實驗器材的準備1．輸精管切除術用器材：彎式有齒鑷、直式有齒鑷、顯微鑷、手術剪、自動小夾涂藥器、自動小夾、帶彎針4/0絲線及持針器、直徑為10cm塑料 Petri氏培
轉基因小鼠模型的建立(SOP)5
4．顯微注射（1）導入DNA的制備：顯微注射首先涉及導入DNA的制備，顯微注射的轉入基因通常為去除載體序列的線狀DNA，轉基因所用載體是真核表達載體，即含有在哺乳動物細胞內表達的真核啟動子。所謂組織特異性的實現多是通過組織特異性啟動子來實現組織特異性表達的。制備轉基因小鼠，必須對待導入DNA進行分離
昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立實驗
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人胰腺癌裸小鼠模型的建立實驗
實驗方法原理 將人胰腺癌細胞株8988 接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d 處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養，HE 染色。 實驗材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌細胞株8988 試劑、
人胰腺癌裸小鼠模型的建立實驗
實驗方法原理 將人胰腺癌細胞株8988 接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d 處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養，HE 染色。實驗材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌細胞株8988試劑、試劑盒 RPMI-1640 完全
人胰腺癌裸小鼠模型的建立實驗
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顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程
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近日，從國家知識產權局獲悉，中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院李鵬研究組發明ZL“一種免疫缺陷小鼠模型的建立方法”獲第十九屆中國ZL優秀獎，該ZL同時也獲得了第四屆廣東省ZL優秀獎。 該ZL技術提供免疫缺陷小鼠模型的建立方法，實現原理為利用TALEN技術構建敲除了免疫相關基因的受精卵，后將獲
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